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标题: 液相色谱负峰 [打印本页]
作者: 123升水 时间: 2025-3-7 17:51
标题: 液相色谱负峰
液相色谱负峰
求助：主峰位置前面有负峰
负峰位置固定
空运行没有，空白溶剂有
更换了流动相 用丙酮清洗了进样针。还是有负峰怎么办？
流动相是乙腈：1%冰乙酸（40:60）
检测器波长254nm
作者: 机智鼠 时间: 2025-3-7 18:13
在液相色谱分析中，负峰的出现可能由多种因素引起。根据您提供的信息，主峰前的负峰位置固定，且空运行时无此现象，表明问题可能与样品制备或进样系统有关。尽管已尝试更换流动相和清洗进样针，但负峰依旧存在，这提示我们需从其他方面考虑解决策略。
首先，检查流动相的纯度和配制过程，确保无杂质引入。乙腈和冰乙酸的比例（40:60）及1%的冰乙酸浓度是否准确，也需核实。其次，考虑是否存在柱前衍生化反应产生的副产物，或是样品中的未知成分与流动相相互作用所致。
建议进一步优化样品前处理方法，如采用更严格的过滤步骤以去除微小颗粒物。同时，尝试调整检测波长，观察负峰是否随波长变化而改变，以排除检测器干扰的可能性。若上述措施均无效，可考虑更换不同品牌的色谱柱或进样针，以排除硬件故障。
参考法规或指南条款：
- 《中国药典》（最新版）中关于液相色谱法的相关章节，特别是样品制备、系统适用性试验及故障排查部分。
- 国际标准化组织（ISO）或美国药典（USP）中关于液相色谱分析的相关标准，可作为方法验证和问题解决的参考。
【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】
作者: 小拇指// 时间: 2025-3-7 18:21
空白的图呢
作者: 123升水 时间: 2025-3-7 18:30
空白就是主峰那边是平的，其他特征没变，包括负峰位置
作者: 歪说歪有李 时间: 2025-3-7 20:59
没有看到你方法的具体信息和仪器配置；从经验看：
这和你的样本的溶剂、稀释剂有关；另一个就是进样管路中的扩散效应；建议从前者入手思考。
若需要，明天可在哔哩聊聊这个主题。
作者: yhgz 时间: 2025-3-7 22:04
路过学习！
作者: 梦幻咖啡 时间: 2025-3-8 07:35
我们做自身对照的对照品溶液，液相色谱也出现类似情况！
作者: 落幕灬 时间: 2025-3-8 07:46
一个冰乙酸的纯度不够可能有杂质，还有样品溶剂与流动相的兼容性，极性差异是否存在较大区别；可以做下空白梯度实验：运行空白梯度（流动相比例从0%到100%乙腈），观察负峰是否随比例变化移动，以判断是否与流动相组成相关。不行的话清洗下整个系统）依次用异丙醇、丙酮、纯水冲洗所有管路及检测池）看看是否哪部分存在污染；还有个就是可以换个柱子看看，慢慢排查去吧
作者: greatwolf 时间: 2025-3-8 08:28
这个应该是对照品的特殊吸收导致的，更大的负峰也见过。。。但这种，很稳定的。
作者: ceq518 时间: 2025-3-8 08:39
提供以下，做个参考吧....
什么原因导致做样时总是在同一时间出现倒峰？
解答： （1） 可能在采集样时选择了背景文件，样品色谱图都被扣除了背景，从而出现倒峰。
（2）在示差检测器等检测器的条件选项中会有极性选择选项，可以通过该选项调整色谱峰的正与负。
（3）样品本身特性导致的倒峰，例如：紫外检测器是通过紫外吸收对样品进行检测的，如果进样里面的样品没有紫外吸收，而流动相有吸收，则样品出峰的时候，峰值会比基线低，所以出现的曲线是看起来就是负的。
作者: 白天的星星v2r 时间: 2025-3-8 09:15
空白溶剂是流动相的话，推测与流动相组成有关，可以调下比例看看
作者: 123升水 时间: 2025-3-8 09:35
老师B站账号是什么，先关注一下
作者: 123升水 时间: 2025-3-8 09:37
谢谢大家的意见，现在溶剂空白扣除一下，以后慢慢排查吧。
作者: J3J 时间: 2025-3-8 11:11
学习了，学习了。
作者: Lily_VIP 时间: 2025-3-8 21:50
学习学习
作者: 歪说歪有李 时间: 2025-3-8 22:41
https://www.bilibili.com/video/BV1yFRsYHESR
知道加链接后回复不了您。所以附上了图片，但愿你能扫码看到视频。
作者: 歪说歪有李 时间: 2025-3-8 22:42
已经录制视频并发布，你可以扫码看看了。另外附送USP 1058 草案评论版的快读。
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