含量（滴定法）方法验证准确度如何做更合理与科学？

红豆杉南国

各位好：使用滴定的方法测试供试品含量，通常来说使用的样品量较多，多数都0.2g以上，如果需要做准确度，用对照品来做，成本很高，以下以种你是否认为哪一种会比较好；
1、使用工作对照品进行（工作对照品使用HPLC法用官方对照品进行了标定）
2、使用样品加官方对照品进行，以供试品为0.2g举例，取供试品0.18g，取官方对照品0.02g混合，通过计算该部分官方对照品测得的值来计算准确度；
3、使用其他已知准确度的方法进行方法验证对比（适用于改方法时，如某产品原使用HPLC的方法测试，并已经过验证，为了节约成本，改为滴定的方法）采用t检验法进行分析对比；

我先发表一下个人的观点：
对于第1种，个人认为官方对照品给定的是纯度，工作对照品仅用HPLC外标法测得的是含量不能直接做为标准值，另通常来说HPLC法比滴定法的误差更大，可能导致标定的结果误差较大，而得出来的结论不同（例如HPLC法通常来说98.0~102.0%，滴定的方法为99.0~~101.0%）如果使用该方法，仅相当于两种方法的对比，类似于第3种方式，但也许标定方法还没有经过验证

对于第二种：个人认为，该方法相对较好，节约对照品的同时，也兼顾了标准值的溯源，该项中0.18g的值是由多次测得的结果平均值进行计算。
3、此方法的前提是前一个方法也需要经过验证，更适合于部分场合使用。

是否还有其他更合适的方法？或者是上述方法你更倾向于哪一种。

yuansoul

风险企业自己承担。用于研究探索很好。

冰城

第二种赞同

13655513565

实际操作可能第一种更好操作。

hongwei2000

没有哪个官方要求回收率检测的样品必须要用对照品去做
无论是官方的还是工作对照品
事实上
对于API主成分来说回收率不需要做
因为可以推论而出
对于制剂主成分来说可以使用API来测
也就是相当于你有个临时的工作对照品
你先用对照品是标定个API的含量
再把已知量的API加入到辅料或样品中做回收即可
至于说你用无论是官方还是自制的工作对照品
由于其含量标示值可能都与你待验证的方法是不同的
尤其是原理是不同的
其值可能会有圈套差别
直接套用其标示值反倒会产生较大的问题

红豆杉南国

hongwei2000 发表于 2014-10-9 13:33
没有哪个官方要求回收率检测的样品必须要用对照品去做
无论是官方的还是工作对照品
事实上

嗯，确实没有要求必须使用对照品去做，是否有其他更合适的方法？另外API用推论的方法得出是怎样推？
附USP1225当中的对于准确度的部分要求：
1、定义：分析方法的准确度系指用该方法所得测试结果与真值的接受程度。
2、测定：对于原料药含量测定，用分析方法测定已知纯度的供试品（如对照品），或用被验证方法测定结果与其他已知准确度的方法测定结果进行比较，测得准确度。对于制剂中药物的含量测定，用分析方法测定制剂成分混合物中按照方法范围加入的已知量被测物，测得准确度，如不能获得全部制剂成分，可向制剂中加主已知量被测物（加样法）进行测定，或用被验证方法测定结果与其他已知准确度的方法测定结果进行比较。

hongwei2000

4. ACCURACY
Accuracy should be established across the specified range of the analytical procedure.
4.1. Assay
4.1.1 Drug Substance
Several methods of determining accuracy are available:
a) application of an analytical procedure to an analyte of known purity (e.g. reference material);
b) comparison of the results of the proposed analytical procedure with those of a second well-characterized procedure, the accuracy of which is stated and/or defined (independent procedure, see 1.2.);
c) accuracy may be inferred once precision, linearity and specificity have been established.

无为

糊涂了

yuansoul

无为 发表于 2014-10-9 14:42
糊涂了

核心：省钱

红豆杉南国

hongwei2000 发表于 2014-10-9 14:38
4. ACCURACY
Accuracy should be established across the specified range of the analytical procedure.
...

C当采用精密度、线性及专属性，可以在推出来的情况下，不必进行，这几个可以通过什么方式综合运用评估？线性是采用Y截距是否小于百分多多少的标准响应来判断还是？

hongwei2000

红豆杉南国 发表于 2014-10-9 16:52
C当采用精密度、线性及专属性，可以在推出来的情况下，不必进行，这几个可以通过什么方式综合运用评估？线 ...

是其中一项
比如含量范围98.0%-102.0%
对应的范围是80%-120%
则对应的截距是正负10%
还有就是空白干扰

红豆杉南国

hongwei2000 发表于 2014-10-9 17:07
是其中一项
比如含量范围98.0%-102.0%
对应的范围是80%-120%

精密度看置信区间的值，专属性用回收率来说明，是这样理解吗？

来自:Android客户端

hongwei2000

红豆杉南国 发表于 2014-10-9 23:23
精密度看置信区间的值，专属性用回收率来说明，是这样理解吗？

来自:Android客户端

应该是通过专属性来说明回收率
专属性是必要条件

喜欢吃桃子

研究很透彻啊 那到底用那种方法合适呢？对照品自己有质量标准，含量滴定的数据，让液相折合其真实含量。然后稳定性的三批用液相测定含量，对照品不再检测，只是到了复验期再检测对照品的含量。这样可用吗？

红豆杉南国

yuansoul 发表于 2014-10-9 15:28
核心：省钱

你点评得太精辟了！

红豆杉南国

hongwei2000 发表于 2014-10-10 08:57
应该是通过专属性来说明回收率
专属性是必要条件

滴定的专属性通常来说是不够的，尤其是有异构体存在的情况下；但是可能会通过杂质项下控制异构体。

红豆杉南国

喜欢吃桃子 发表于 2015-3-25 14:45
研究很透彻啊 那到底用那种方法合适呢？对照品自己有质量标准，含量滴定的数据，让液相折合其真实含量。然后 ...

含量滴定的数据，液相折合你是用什么方式进行的折合？