液相由梯度最高比例有机相回复初始比例有机相，冲30分钟会出现一个峰

lovestone1990 · 发表于 2016-11-8 21:17:46

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即使是跑空白该峰也会出现，用的流动相是乙腈和四丁基氢氧化胺盐，不知道是什么原因

86419405 · 发表于 2016-11-8 21:42:06

柱子里有残留物质

悠游小鱼 · 发表于 2016-11-9 06:40:05

查找你所有进样中空白所接触到的物品，包括滤头，针筒，滴管等

lovestone1990 · 发表于 2016-11-9 07:32:23

悠游小鱼发表于 2016-11-9 06:40
查找你所有进样中空白所接触到的物品，包括滤头，针筒，滴管等

这个峰每次每次进样前都冲出来，我们进样前平衡色谱柱流程是先用梯度中最大有机相比例冲洗色谱柱大约30分钟，直到没有杂质峰出现，改为用初始比例有机相平衡，平衡过程大约30分钟，该峰就会出现，然后开始进样，进样过程中，供试品和空白又可以把这个峰冲出来，原来我们以为这可能是因为流动相有杂质和色谱柱结合紧密所导致的，不过只是猜测，没法证实

zysx01234 · 发表于 2016-11-9 08:09:21

冲出来很正常啊

有些方法本身就有缺陷的，可能就会造成方法/程序是走完了但是残留可能还在，可以考虑有纯溶剂再低流速（0.8及以下）情况下按梯度走1-2次，这样能最大限度赶走残留。

hongwei2000 · 发表于 2016-11-9 08:35:51

lovestone1990 发表于 2016-11-9 07:32
这个峰每次每次进样前都冲出来，我们进样前平衡色谱柱流程是先用梯度中最大有机相比例冲洗色谱柱大约30分 ...

初始流动相的洗脱能力是比较差的
如果用初始流动相能够冲出东西来
不管这个东西来自于哪里
说明色谱条件是有问题的
这个洗脱应该是在高比例有机相下完成的任务
也就是说
在高比例有机相下应该冲洗更长的时间
例如增加5分钟

lovestone1990 · 发表于 2016-11-11 07:14:53

hongwei2000 发表于 2016-11-9 08:35
初始流动相的洗脱能力是比较差的
如果用初始流动相能够冲出东西来
不管这个东西来自于哪里

我也觉得很诡异，所以苦于找不到原因，也是醉啦

[研发注册] 液相由梯度最高比例有机相回复初始比例有机相，冲30分钟会出现一个峰

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