菌液浓度确定，稀释级别做法，忘批评指正，

yuan29fen · 发表于 2016-12-15 22:18:47

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我公司属于新建公司，最近要做培养基适用性检查，我们买的是第三方公司的的1代菌悬液，回来后放置室温后,金黄色葡萄菌，枯草芽孢杆菌，铜绿假单胞菌取0.3ml，接至TSB中增菌24小时，今天确定稀释级，我用的是10ml的试管，刚开始0.5ml菌液加到4.5ml无菌氯化钠中10倍稀释，发现液面太低，用移液枪时会碰到试管口01会不会有污染呢，然后我又用1ml菌液9ml无菌氯化钠10倍稀释，是不是每稀释一级都要摇匀后在进行下一步，在10ml试管中不太好摇匀，还有就是稀释级别时，是敞口的的还是每稀释一级，就要盖好塞子，大家确认级别有什么细菌需要主意呢，我每个菌做十的负4，5,6,7*8，等待技术中你们是怎么做的，说下呗

joshua · 发表于 2016-12-16 08:02:42

第三方一般不都是4代工作菌种吗？一代菌悬液的有吗？

稀释操作你自己理论上想想为什么，再结合最终计数的结果，应该能摸索出合适的方法的

★风★ · 发表于 2016-12-16 08:45:55

稀释一般我们都是1到9的里面的，然后混匀后再做下一个稀释。至于稀释后是不是需要盖盖子要看你们操作的连续性了，我们都是盖的。

阿秀哥 · 发表于 2016-12-16 09:17:05

没稀释一个梯度都是要摇均匀的，最好用漩涡振荡器吧

yuan29fen · 发表于 2016-12-16 22:13:33

joshua 发表于 2016-12-16 08:02
第三方一般不都是4代工作菌种吗？一代菌悬液的有吗？

稀释操作你自己理论上想想为什么，再结合最终计数 ...

实验已经有一点眉目了，一点一点摸索中，谢谢帮助，今天做感觉操作已经好了很多，就看过两天结果了了

yuan29fen · 发表于 2016-12-16 22:17:52

joshua 发表于 2016-12-16 08:02
第三方一般不都是4代工作菌种吗？一代菌悬液的有吗？

稀释操作你自己理论上想想为什么，再结合最终计数 ...

有的，他们都是冷冻在甘油冻干管中，一代菌悬液我们回来自己增菌，在确定稀释级，昨天做的枯草还可以有多到少，但其铜绿和金黄的稀释到10的负八次方还是长得很凶，是不是这两个菌长得很快，明天再往下稀释看看，

yuan29fen · 发表于 2016-12-16 22:18:31

阿秀哥发表于 2016-12-16 09:17
没稀释一个梯度都是要摇均匀的，最好用漩涡振荡器吧

今天已经用了漩涡混合器了，感觉会好很多，

yuan29fen · 发表于 2016-12-16 22:18:56

★风★ 发表于 2016-12-16 08:45
稀释一般我们都是1到9的里面的，然后混匀后再做下一个稀释。至于稀释后是不是需要盖盖子要看你们操作的连续 ...

我仔细想了想确实应该这个样子，嘻嘻

yuan29fen · 发表于 2016-12-16 22:19:30

★风★ 发表于 2016-12-16 08:45
稀释一般我们都是1到9的里面的，然后混匀后再做下一个稀释。至于稀释后是不是需要盖盖子要看你们操作的连续 ...

嗯已采用

[检验及监测] 菌液浓度确定，稀释级别做法，忘批评指正，

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