流动相配制

jmmarui

         最近在检测过程中，对于流动相的处理出现了疑问，具体方法操作如下：
        有关物质：取本品0.5 g，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，作为供试品溶液；取4-羟基苯甲酸、4-羟基间苯二甲酸和苯酚对照品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含4-羟基苯甲酸5μg、4-羟基间苯二甲酸2.5μg和苯酚1μg的混合溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录V D）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（60∶40∶1）为流动相；检测波长为270nm。取对照品溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使苯酚色谱峰的峰高约为满量程的10%；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如有与对照品溶液中保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，4-羟基苯甲酸不得过0.1%，4-羟基间苯二甲酸不得过0.05%，苯酚不得过0.02%；其他单个杂质峰面积不得大于对照品溶液中4-羟基间苯二甲酸峰面积（0.05%）；各杂质峰面积的和不得大于对照品溶液中4-羟基苯甲酸峰面积的2倍（0.2%）。
      关于这个流动相的理解，经讨论和分析，暂定以下三种方案：
    1  直接配的  也是最接近的  
   2 甲醇-1%冰醋酸（60：40）
   3  甲醇-2.5%冰醋酸（60:40）
   我们已经采用的是第二种方案，但分离度不好。
请问一哈，各位蒲友有何高见？

cheng9gong

应该按1来配，冰醋酸作为扫尾剂使用

巴西木

jmmarui :你好！按照中国药典2010年版二部附录V D 高效液相色谱法 中说道“各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相种类、检测器类型不得改变外，其余如色谱柱内经、长度、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可以适当改变，以适应供试品并达到系统适用性试验的要求。”
  所以你用的流动相 甲醇-水-冰醋酸不能改变，流动相的比例（60∶40∶1），可适当调整，以满足供试品并达到系统适用性试验的要求

莫颜雨

同意板凳意见，参加中国药典2010年版二部附录V D 高效液相色谱法 流动相可以在一定范围内调整，附录里面说的很明白。

咕咕

直接配制,适当调解比例.

四叶花

nmwang66 发表于 2012-7-18 18:16
jmmarui :你好！按照中国药典2010年版二部附录V D 高效液相色谱法 中说道“各品种项下规定的条件除固定相种 ...

支持

jmmarui

nmwang66 发表于 2012-7-18 18:16
jmmarui :你好！按照中国药典2010年版二部附录V D 高效液相色谱法 中说道“各品种项下规定的条件除固定相种 ...

谢谢！了解了！