为什么TSB那么容易长菌

gudanxiaoai

最近做了四批无菌，
有2批的TSB全部长菌，包括阴性。
是TSB的特性容易被污染吗？
以前用的锥形瓶灭菌，从来没有出现过这个问题，
现在换成了盐水瓶，就出现这个问题，
上次灭了3瓶，3瓶倒了10个一次性集菌培养器（1瓶4个，最后一瓶2个），全部都长菌。
灭菌方式高温高压121℃30min，
每次盐水瓶用的硅胶盖都是新的。
硫乙醇酸盐一点问题都没有。

静水蓝心

环境、操作是关键

gudanxiaoai

静水蓝心 发表于 2018-2-6 09:12
环境、操作是关键

可是硫乙醇酸盐一点问题都没有。我们都不敢先进TSB再进硫乙醇酸盐了。就怕TSB污染了管道。
至少能保住硫乙醇酸盐的集菌培养器安全。

圆and缘

你的检验环境或操作肯定有问题

静水蓝心

gudanxiaoai 发表于 2018-2-6 09:25
可是硫乙醇酸盐一点问题都没有。我们都不敢先进TSB再进硫乙醇酸盐了。就怕TSB污染了管道。
至少能保住硫 ...

那是因为适宜生长的菌群是不一样的，你觉得呐？

gudanxiaoai

圆and缘 发表于 2018-2-6 09:46
你的检验环境或操作肯定有问题

可是我用锥形瓶的方法没有长菌，就是锥形瓶灭菌，然后打开瓶盖针头吸TSB 。这种操作方法按理说应该操作更容易染菌。
我准备今天再做一次，做一个放在盐水瓶的空白。

圆and缘

gudanxiaoai 发表于 2018-2-6 12:39
可是我用锥形瓶的方法没有长菌，就是锥形瓶灭菌，然后打开瓶盖针头吸TSB 。这种操作方法按理说应该操作更 ...

你的环境需要大消毒

gudanxiaoai

圆and缘 发表于 2018-2-6 15:59
你的环境需要大消毒

额  大概是我的回复没有说清楚。

同一个试验，我用的锥形瓶倾斜取TSB，没有问题，盐水瓶用针头插进硅胶盖取TSB，长菌。
如果环境有问题，锥形瓶倾斜取TSB为什么没有问题呢？它敞开的口更大啊

公子小德

gudanxiaoai 发表于 2018-2-7 10:35
额  大概是我的回复没有说清楚。

同一个试验，我用的锥形瓶倾斜取TSB，没有问题，盐水瓶用针头插进硅 ...

会不会是盐水瓶口小，灭菌不彻底呢

xqliu

可能是瓶、胶塞及其他工器具清洗、灭菌不彻底，你再确认一下吧。仅供参考

竺紫郁

哪家的TSB，我们用环凯和三药的，121度15分钟灭菌，使用输液瓶装，双层灭菌袋包装，没遇到过你说的这种情况

竺紫郁

集菌器有没有问题？硫乙醇和TSB配制的时候是不是同时灭菌，是否用相同的瓶子装？配制后培养基的无菌检查结果是否符合规定？

凝砂

TSB属于基础培养基，确实适宜很多菌生长。但是如果使用器具，操作还有环境没问题的话，是不可能那么频繁的长菌的，联系楼主还是回忆一下，排除操作过程中的小细节！

鹿boss你好！

盐水瓶灭菌之前要把橡胶塞用针头扎一下，然后再封口灭菌。这边老师用盐水瓶都是这么操作。

zj3801033

什么培养基都一样，培养基被污染的最大问题是操作

gudanxiaoai

zj3801033 发表于 2018-3-29 12:34
什么培养基都一样，培养基被污染的最大问题是操作

可是盐水瓶的好处不就是让操作失误降低吗
盐水瓶取样是针头消毒，然后插进盐水瓶的塞子，用泵吸液体。
我用锥形瓶做的话，要先取掉锥形瓶塞子，锥形瓶瓶口完全暴露在超净工作台里，再插针进去，更容易操作失误啊

胜利者

佳酿

yudingshi

原因如下：1.TSB是广谱增菌培养基，不然药典也不会选择它来做无菌检验。2.你们的检验流程或用具有问题。

棒棒爹

TSB需氧菌和真菌

东皇太心

我猜你们单位没有隔离器。做实验都在B+A环境下作的吧？你TSB长菌一般情况下都是人为操作污染了，动作不规范。建议买隔离器