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[2020版药典] 【药典三部】 体外培养法检测病毒因子的阳性对照应该选择什么病毒?血吸附阳性?

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发表于 2021-6-25 08:45:25 | 显示全部楼层 |阅读模式

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本帖最后由 我爱学习1 于 2021-6-25 08:48 编辑

刚入行的小白请教各位大佬,药典三部 细胞检定中内外源病毒因子检查的cpe、血吸附、血凝集实验的阳性对照应该采用什么病毒?一种还是多种?感谢!!!

药典摘录:
(2)体外不同指示细胞接种培养法检测病毒因子  用待检细胞培养上清液制备活细胞或细胞裂解物,分别接种至少下列三种单层指示细胞,包括猴源细胞、人二倍体细胞和同种属、同组织类型来源的细胞。待测样本检测前,可于 -70℃ 或以下保存。  每种单层指示细胞至少接种 107 个活细胞或相当于 107 个活细胞的裂解物。接种量应占维持液的 1/4 以上,每种指示细胞至少接种 2 瓶。取培养 7 天的细胞各 1 瓶,取上清液或细胞裂解物再分别接种于新鲜制备的相应的指示细胞盲传一代,与初次接种的另一瓶细胞继续培养 7 天,观察细胞病变,并在观察期末取细胞培养物进行血吸附试验;取细胞培养上清液进行红细胞凝集试验。  用  0.2%~0.5% 豚鼠红细胞和鸡红细胞混合悬液进行血吸附试验和红细胞凝集试验。将混合红细胞加入细胞培养瓶,一半置于 2~8℃ 孵育 30 分钟,一半置于 20~25℃ 孵育 30 分钟,分别进行镜检,观察红细胞吸附情况。取细胞上清液从原倍起进行倍比稀释后,加入混合红细胞,先置 2~8℃ 孵育 30 分钟,然后置于 20~25℃ 孵育 30 分钟,分别观察红细胞凝集情况。  接种的每种指示细胞不得出现细胞病变,血吸附试验及红细胞凝集试验均应为阴性。试验应设立病毒阳性对照,包括可观察细胞病变的病毒阳性对照、血吸附阳性对照及血凝阳性对照。如待检细胞裂解物对单层细胞有干扰,则应排除干扰因素。
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药徒
发表于 2021-8-20 21:49:12 | 显示全部楼层

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用PI3,副流感病毒
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 楼主| 发表于 2021-8-23 12:23:18 | 显示全部楼层
Niki12345 发表于 2021-8-20 21:49
用PI3,副流感病毒

感谢                                                                       
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