腺病毒载体相关知识科普

LORA2022

腺病毒载体相关知识

一、腺病毒：

1、  腺病毒（Adenovirus,ADV）是什么：

腺病毒是一种常见的呼吸道病毒， 无包膜的线性双链DNA病毒，在自然界分布广泛。

2、  腺病毒的导致症状

腺病毒感染人体后，可导致发热性的呼吸系统感染、眼结膜热、角膜结膜炎、泌尿系统感染及胃肠炎症等。

3、  腺病毒的传播途径：

传播可通过呼吸道、消化道及眼结膜侵入人体，在密集人群中可发生流行。

二、腺病毒载体：

1、 重组腺病毒应用背景：

在过去的几十年间，复制缺陷的人类重组腺病毒V5（adV5）已经成为一种广泛应用在真核基因表达分析、疫苗研究和基因治疗等领域的模式系统。这种经修饰后的腺病毒，其E1和E3基因已被移除，依然具备细胞感染的能力，而不产生新的病毒颗粒。

即：进入靶细胞后病毒不能复制，但可以表达目的蛋白。

2、  腺病毒表达系统：

野生型腺病毒基因组是一条长约36 kb的线性双链DNA（dsDNA）分子，故插入大片段外源基因的潜力大。 基因组的两个末端被称为InvertedTerminal Repeat (ITR)。两个末端之间的序列包含了病毒DNA复制所需要的基因序列。病毒必须要复制它的基因组来衍生后代。

a)        腺病毒生命周期根据病毒DNA复制过程可分成早期和晚期。

b)        在生命周期早期表达的基因，称为早期基因。有4个主要早期基因，按照表达先后排序依次是E1、E2、E3、E4。在生命周期晚期表达的基因，称为晚期基因，有5个主要晚期基因，按照表达先后排序依次是L1、L2、L3、L4、L5。

c)        为了制备出自我复制功能丧失的重组腺病毒，E1区域被删除掉。这使得重组腺病毒成为一种安全的基因运输工具。为了进一步增加重组腺病毒的包装能力，E3区域也同时被删除掉。E3基因产物会提高宿主的免疫反应，而且对病毒生产不重要。

d)        缺失了E1和 E3区域的腺病毒基因组序列被克隆到质粒上。这个质粒就是腺病毒载体了。E1基因片段被整合到293细胞。这株细胞株就是重组腺病毒的包装细胞株了。

三、腺病毒载体的发展

第一代腺病毒载体仍是科研和临床应用最为广泛的腺病毒载体。一般常用Ad5型、Ad2型腺病毒。Janssen近期被FDA限制使用的疫苗使用的是腺病毒26型（Ad26）载体。

爱笑的眼睛12

handshake  学习了~~~

Wjd1

感谢楼主的大力奉献精神

是老王呀

感谢分享！