细菌内毒素干扰预实验选择何种灵敏度鲎试剂

Mystery123

算MVD的时候用哪种灵敏度鲎试剂计算，干扰预实验是否需要用同计算时的鲎试剂；干扰实验又需要用哪种呢。

火舞精灵

参考药品检验操作规范，干扰预实验计算MVD采用0.03的鲎试剂（市面最高灵敏度的鲎试剂），正式干扰试验根据产品情况，尽可能选择灵敏度低的鲎试剂，减少误差降低成本。

七-月

先确定用于测试的鲎试剂的灵敏度，一般选择0.25EU/ml或0.125EU/ml，用这个灵敏度和供试品限度等计算最大有效稀释倍数，干扰预实验和干扰试验均是使用和前者相同的鲎试剂。

狐年少

选择鲎试剂

Mystery123

七-月 发表于 2022-7-14 15:20
先确定用于测试的鲎试剂的灵敏度，一般选择0.25EU/ml或0.125EU/ml，用这个灵敏度和供试品限度等计算最大有 ...

例：计算:限度2.5EU/g，浓度10%，鲎试剂灵敏度0.03125；得最大稀释倍数8倍
       干扰预：用0.25灵敏度同时做0 2 4 8倍，结果2倍开始阳性
       干扰实验：用0.25灵敏度做2或4或8倍浓度。
   这么做没毛病吧

Mystery123

七-月 发表于 2022-7-14 15:20
先确定用于测试的鲎试剂的灵敏度，一般选择0.25EU/ml或0.125EU/ml，用这个灵敏度和供试品限度等计算最大有 ...

例：计算:限度2.5EU/g，浓度10%，鲎试剂灵敏度0.03125；得最大稀释倍数8倍
       干扰预：用0.25灵敏度同时做0 2 4 8倍，结果2倍开始阳性
       干扰实验：用0.25灵敏度做2或4或8倍浓度选一个做。
   这么做没毛病吧

Mystery123

火舞精灵 发表于 2022-7-14 14:02
参考药品检验操作规范，干扰预实验计算MVD采用0.03的鲎试剂（市面最高灵敏度的鲎试剂），正式干扰试验根据 ...

例：计算:限度2.5EU/g，浓度10%，鲎试剂灵敏度0.03125；得最大稀释倍数8倍
       干扰预：用0.25灵敏度同时做0 2 4 8倍，结果2倍开始阳性
       干扰实验：用0.25灵敏度做2或4或8倍浓度选一个做。
   这么做没毛病吧

火舞精灵

Mystery123 发表于 2022-7-14 15:54
例：计算:限度2.5EU/g，浓度10%，鲎试剂灵敏度0.03125；得最大稀释倍数8倍
       干扰预：用0.25灵敏度 ...

没毛病，用两个厂家的鲎试剂和三个连续生产批次的产品进行正式干扰试验就可以了。

芳草地2005

选择鲎试剂

嘀嗒嘀嘀

火舞精灵 发表于 2022-7-14 15:59
没毛病，用两个厂家的鲎试剂和三个连续生产批次的产品进行正式干扰试验就可以了。

用0.03算出的MVD怎么能用0.25的鲎试剂做？那就超0.25的MVD了啊。

火舞精灵

嘀嗒嘀嘀 发表于 2022-7-14 16:06
用0.03算出的MVD怎么能用0.25的鲎试剂做？那就超0.25的MVD了啊。

这个只是干扰预实验的计算，可以获得样品的最大不干扰浓度或最低稀释倍数。

Mystery123

火舞精灵 发表于 2022-7-14 16:09
这个只是干扰预实验的计算，可以获得样品的最大不干扰浓度或最低稀释倍数。

我也有上面老师一样的疑问，我始终认为 计算 干扰预 应该用同种鲎试剂，再或者加上干扰实验。这里面好绕啊

Mystery123

火舞精灵 发表于 2022-7-14 16:09
这个只是干扰预实验的计算，可以获得样品的最大不干扰浓度或最低稀释倍数。

在吗 看看回复

火舞精灵

Mystery123 发表于 2022-7-20 14:30
在吗 看看回复

预实验只是选择几个稀释倍数，也就是几个样品浓度，0.03仅仅用于计算，预实验和正式干扰试验用的鲎试剂是同一灵敏度的

Luvian2C

火舞精灵 发表于 2022-7-21 10:29
预实验只是选择几个稀释倍数，也就是几个样品浓度，0.03仅仅用于计算，预实验和正式干扰试验用的鲎试剂是 ...

请教一下 假如我产品限值15EU/ml MVD按0.03算是500倍 干扰预实验和干扰试验得出的结果是100倍稀释液不干扰
那在进行内毒素限值实验时，就不能使用0.25的鲎试剂了吗，因为此时MVD是60倍？

火舞精灵

Luvian2C 发表于 2022-8-3 10:01
请教一下 假如我产品限值15EU/ml MVD按0.03算是500倍 干扰预实验和干扰试验得出的结果是100倍稀释液不干 ...

预实验的目的只是筛选出样品的不干扰浓度，在预实验中按0.03计算MVD可能是500倍，然后预实验时一般会选择30倍、60倍、120倍、240倍、480倍的浓度进行预实验，预实验过程可以采用选定的鲎试剂，比如0.25的鲎试剂，然后预实验的结果会有一些浓度有干扰，甚至几个浓度都没有干扰或都有干扰，如果预实验结果中有不干扰的浓度，那么就可以采用这个浓度进行正式的干扰试验，如果都有干扰，那么就得选择更高灵敏度的鲎试剂进行预实验。

Luvian2C

火舞精灵 发表于 2022-8-3 10:28
预实验的目的只是筛选出样品的不干扰浓度，在预实验中按0.03计算MVD可能是500倍，然后预实验时一般会选择 ...

感谢您的回复
我的主要问题是内毒素限度检查中，我司目前只有0.25EU的鲎试剂，如果干扰预实验得到的不干扰稀释倍数是100倍，限度检查就必定不能用0.25的鲎试剂了，是这样吗？

火舞精灵

Luvian2C 发表于 2022-8-3 11:01
感谢您的回复
我的主要问题是内毒素限度检查中，我司目前只有0.25EU的鲎试剂，如果干扰预实验得到的不干 ...

不是，有干扰才需要更换高灵敏度的鲎试剂，没干扰就没必要换，药典上有说明的。

Mystery123

最近同事又是这么理解我们的问题的，原液10%，限度2.5，mvd=c*l/λ=8.33倍；干扰预实验（0.25鲎试剂）做了0 2 4 8倍，2倍开始没有干扰；干扰实验选择了4倍做，这时候应该带回公式算选择鲎试剂，4=2.5%*2.5/λ，得λ=0.015，那我应该选择0.15的鲎试剂做干扰实验。怎么看你之前回复的是选择和干扰预实验一样的0.25 。包括鲎试剂厂家也是这么回复我的。

火舞精灵

Mystery123 发表于 2022-8-10 14:57
最近同事又是这么理解我们的问题的，原液10%，限度2.5，mvd=c*l/λ=8.33倍；干扰预实验（0.25鲎试剂）做了0 ...

在预实验过程中，2倍没有干扰，也就是最大不干扰浓度是5%，选择4倍进行正式干扰试验，选择的浓度是2.5%，鲎试剂一直采用的0.25鲎试剂，然后计算就是10%*2.5/0.25=1，所以选择0.25的鲎试剂只能采用原液（1倍）检测，因为2倍开始没有干扰，所以上述预实验需要重新进行，采用更高灵敏度的鲎试剂，另外计算MVD不能以最终浓度计算，应以初始浓度计算，因为是液体，可以按原液的浓度10%计算。