阴离子柱好难啊！请求前辈们帮忙！

奈何心未灭 · 发表于 2022-11-30 17:14:24

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Q柱，0到20%B梯度洗脱，蛋白在那一堆小峰里完全分不开。
然后想要拉长洗脱，提高梯度时间，但还是分不开，提高ph，也没好效果。怎么办才好呢？

Maybe12345678 · 发表于 2022-11-30 17:29:20

没看懂离子柱洗脱不是和盐浓度有关吗一般使用不同盐浓度的中性洗脱液调节pH作用不大吧盐浓度高就会把蛋白置换脱柱

奋斗的小青年a · 发表于 2022-12-1 08:24:16

电导的影响应该大于pH，可以试着做一个盐浓度梯度，尽量把梯度的斜率放缓

林夕儿 · 发表于 2022-12-1 13:58:22

本帖最后由林夕儿于 2022-12-1 14:20 编辑

用盐浓度梯度。
（最好看下实际操作图谱和工艺规程有没有出入，排除人为操作问题；然后可以尝试优化平衡体积，多洗杂）
另外，有图谱吗？看一下

凯恩血蹄 · 发表于 2022-12-7 19:32:28

凝胶的分辨率不合适

3812288 · 发表于 2022-12-19 14:44:30

可以换不同厂家Q柱

AA丨HGG · 发表于 2023-1-9 16:46:11

阴阳离子层析不是依据蛋白在不同PH中电性不同吗？