脂质体内毒素检测

skyva0 · 发表于 2023-9-26 17:07:53

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请问各位同仁，脂质体包裹mRNA的生物样品，你们是怎样检测内毒素的？我们采用光度法和凝胶法都有干扰，请问有什么方法可以消除干扰的。

sd2789390 · 发表于 2023-9-27 10:32:13

1、有没有排查干扰可能来自于哪里？
2、常规的消除干扰的方法（Tris Buffer、钙离子、镁离子、葡聚糖的拮抗剂）都试过了吗？

Quasimodo。 · 发表于 2023-9-27 13:58:07

sd2789390 发表于 2023-9-27 10:32
1、有没有排查干扰可能来自于哪里？
2、常规的消除干扰的方法（Tris Buffer、钙离子、镁离子、葡聚糖的拮 ...

s老师专业顺便补充一条稀释倍数是否已经做到最大有效稀释倍数，如果没有的话建议可以再放大稀释倍数试试

skyva0 · 发表于 2023-9-28 09:13:23

sd2789390 发表于 2023-9-27 10:32
1、有没有排查干扰可能来自于哪里？
2、常规的消除干扰的方法（Tris Buffer、钙离子、镁离子、葡聚糖的拮 ...

这个干扰来源于脂质体，在测试时，脂质体是相当于不溶物；我们在扩大足够大的倍数时，控制实验的各项质控指标都符合要求，但又不符合质量标准；所以有没有消除脂质体干扰的辅助剂或者方法

sd2789390 · 发表于 2023-9-28 11:05:43

skyva0 发表于 2023-9-28 09:13
这个干扰来源于脂质体，在测试时，脂质体是相当于不溶物；我们在扩大足够大的倍数时，控制实验的各项质控 ...

你的样品在BET中是混悬液，这样你可以先采用超声的方式先制成混悬液，然后取上清进行检测，您这边有没有试过这种方法

skyva0 · 发表于 2023-9-28 14:25:29

sd2789390 发表于 2023-9-28 11:05
你的样品在BET中是混悬液，这样你可以先采用超声的方式先制成混悬液，然后取上清进行检测，您这边有没有 ...

这个没有试过

sd2789390 · 发表于 2023-9-28 17:14:38

skyva0 发表于 2023-9-28 14:25
这个没有试过

可以参考一些不溶于水的样品检测内毒素的方法，制成BET水混悬液，取上清进行检测，看看之前你的干扰是增强的还是抑制的

大九 · 发表于 2023-10-23 17:22:45

应该用试剂溶解样品，一般二甲基亚砜可以溶解，然后做内毒素检查

skyva0 · 发表于 2023-10-24 11:15:59

大九发表于 2023-10-23 17:22
应该用试剂溶解样品，一般二甲基亚砜可以溶解，然后做内毒素检查

买了一个分散剂

xiaoyuyanran · 发表于 2023-11-12 13:15:23

用分散剂或乙醇之类有机溶剂试试;
试过分散剂是有效果的,安度斯有相应的分散剂

元ef832dc5 · 发表于 2024-1-5 20:19:10

你们有出现低稀释倍数不干扰，高稀释倍数干扰的情况吗?比如40倍不干扰，160倍却干扰了

skyva0 · 发表于 2024-1-8 08:48:57

元ef832dc5 发表于 2024-1-5 20:19
你们有出现低稀释倍数不干扰，高稀释倍数干扰的情况吗?比如40倍不干扰，160倍却干扰了

没有出现过这样的情况

阿白sqg · 发表于 2024-1-26 14:58:05

可以用曲拉通溶解掉脂质体，然后去检测试一下

唐tang1 · 发表于 2024-2-2 11:20:40

如果回收率低于下限，考虑使用生物分散剂解除抑制。

微信rrqqkg99 · 发表于 2024-2-26 08:50:08

元ef832dc5 发表于 2024-1-5 20:19
你们有出现低稀释倍数不干扰，高稀释倍数干扰的情况吗?比如40倍不干扰，160倍却干扰了

您要查看下一下您样本里面的原料，PH是否有问题

ICE666 · 发表于 2024-3-22 16:39:31

需要先破乳，再研究方法

skyva0 · 发表于 2024-3-25 14:58:19

ICE666 发表于 2024-3-22 16:39
需要先破乳，再研究方法

谢谢了，已经做出来啦。

laokuang · 发表于 2024-4-10 10:53:12

CRL有一种分散剂，你可以咨询一下

张木木 · 发表于 2024-5-7 10:23:37

就是怎么能看出来脂质体是不是已经被破坏掉了呢？我们产品是溶于BET水的，就是很疑惑

蒲公英696670797 · 发表于 2024-5-14 14:16:37

下载分享，感谢楼主

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