酸败度测定法中羰基值检测技术优化

苏祥会

酸败度测定法中羰基值检测技术优化

酸败是指油脂或含油脂的种子类药材和饮片，在贮藏过程中发生复杂的化学变化，生成游离脂肪酸、过氧化物和低分子醛类、酮类等产物，出现特异臭味，影响药材和饮片的感观和质量。

一、油脂提取

除另有规定外，取供试品30～50g（根据供试品含油脂量而定），研碎成粗粉，置索氏提取器中，加正己烷100～150ml（根据供试品取样量而定），置水浴上加热回流2小时，放冷，用3号垂熔玻璃漏斗滤过，滤液置水浴上减压回收溶剂至尽，所得残留物即为油脂。

二、酸败度测定

羰基值测定 羰基值系指每1kg油脂中含羰基化合物的毫摩尔数。

除另有规定外，取油脂0.025～0.5g，精密称定，置25ml量瓶中，加甲苯适量溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml，置25ml具塞刻度试管中，加4.3%三氯醋酸的甲苯溶液3ml及0.05% 2，4-二硝基苯肼的甲苯溶液5ml，混匀，置60℃水浴加热30分钟，取出冷却，沿管壁缓缓加入4%氢氧化钾的乙醇溶液10ml，加乙醇至25ml，密塞，剧烈振摇1分钟，放置10分钟，以相应试剂作空白，照紫外-可见分光光度法（通则0401）在453nm波长处测定吸光度，按下式计算：

式中  A为吸光度；

W为油脂的重量，g；

854为各种羰基化合物的2，4-二硝基苯肼衍生物的摩尔吸收系数平均值。

三、基本原理

油脂或含油脂的药材中的羰基化合物与2,4-二硝基苯肼作用，生成的衍生物在碱性的乙醇溶液中呈酒红色或红褐色，在453nm波长处测定吸光度，计算羰基值。

四、操作要点及注意事项

（1）减压回收溶剂。可设温度40度，转速设80左右，时长不超20分钟，注意旋蒸时间不宜过长，旁边可放计时器作为参考。

（2）油脂的取用量。通常检品为原药材检测极易合格，甚至低于空白实验的检测值。可以增大油脂的取用量，最好接近0.5g。

平行实验的取用量最好接近，防止样品混淆后带来较大误差。

（3）测定方法中所用试剂均需精密加入，可使用0-5ml的移液枪。

（4）试剂配置。4%氢氧化钾的乙醇溶液的配制。置具橡皮塞的棕色玻瓶中。注意碱性溶液不能用玻璃塞，应该用橡皮塞。

（5）刚开始沿管壁缓缓加入4%氢氧化钾的乙醇溶液使之分层（附图），否则溶液提前与之反应，最终结果偏低。

（6）剧烈振摇1分钟。由于男、女实验员手腕振摇力度不同。力度较小会使溶液反应不完全，吸光度的数值往往偏高，结果偏大。因此试管振荡器（旋涡混合器）代替手工振摇很有必要，(附图）。经两种振摇方式处理最终结果相差不大，相对偏差仅在4%以内。使用振荡器时一定要双手支撑，保证稳定，旁边放计时器，准确到秒。

王李玉珏

感谢分享，学习一下

xqliu

学习了，谢谢提供分享。

武勇

感谢分享！相互学习！

付娴

老师能请教一个问题吗？我的羰基值有时会出现负值，吸光度比空白小。

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