关于使用薄膜过滤法进行微生物限度检查方法适用性试验的一些疑问

Vee-20

求助各位大佬
薄膜过滤法做法如下：（已知样品具有抑菌性并且能通过冲洗消除抑菌性）
1.试验组：取1:10的供试液10ml，经薄膜过滤处理后，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，每次100ml，共冲洗3次，在最后一次冲洗液中加入1ml试验菌液（浓度为103～104cfu/ml），每种试验菌平行制备两份，取出滤膜贴于TSA平板上。
2.菌液对照组：取1ml试验菌液（浓度为103～104cfu/ml）加至100mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀，经薄膜过滤处理后同试验组操作。
3.菌液对照组：取1ml试验菌液（浓度为103～104cfu/ml）加至100mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀，经薄膜过滤处理后，取出滤膜贴于TSA平板上。
4.菌液对照组：取1ml试验菌液（浓度为10～102cfu/ml）注皿，倾注培养基。
请问一下菌液对照组哪个才正确？2、3为需要过膜的情况，这种情况下是否要进行冲洗？为什么要冲洗？还有一种情况是4，有位具有30多年微生物经验的前辈认为菌液对照组没有必要过膜，直接取不大于100cfu的菌液注皿即得。
恳请各位大佬解答。

逸清草堂

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药典已经说的很明白了，你自己在家看一下，写的很清楚

小苹果011122

试验组：取1:10的供试液10ml，经薄膜过滤处理后，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，每次100ml，共冲洗3次，在最后一次冲洗液中加入1ml试验菌液（浓度为103～104cfu/ml），每种试验菌平行制备两份，取出滤膜贴于TSA平板上。
这个试验方法就有问题吧，取的供试液是10ml确定加入的是1毫升1000-10000cfu的菌液，应该是加入的是0.1毫升1000-10000cfu的菌液吧，使得最后加入的菌量不大于100CFU,然后菌液对照组的要求是PH7.0代替供试液，然后同样的操作手法，在最后一次冲洗液中加入菌液

小苹果011122

可以仔细去看下2019版药典检验操作规范，里面对相关验证的操作有所举例

小苹果011122

再修正下，薄膜过滤法，是在最后一次冲洗液中加入不大于100cfu的菌，使得最后一张膜的菌落不大于100cfu,所以应该是最后一次冲洗液中加入1毫升100cfu/ml的菌液或者是0.1毫升100-1000cfu/ml的菌液，关键点是最后一张膜里的菌量不能大于100

（、

蹲坑学习一下

Dog大户

取0.1ml不大于100cfu的菌液计数也行吧我觉得