微生物限度方法验证

玲ckehchhh

各位老师我们公司有个原料药水不溶，在做微生物限度方法验证时，参考了药典加吐温80，使分散性变好，我想咨询，加了吐温80后是静置几分钟取上清液进行验证可以吗？

鬼使神差

加了吐温80后仅静置几分钟取上清液进行验证通常是不可以的。

吐温80主要是作为表面活性剂来增加原料药水的分散性，但仅仅静置几分钟可能无法保证微生物在体系中达到均匀分布。微生物在液体中的分布需要一定时间来达到平衡状态，如果静置时间过短，可能导致上清液中微生物的数量不能准确代表整个样品中的微生物含量，从而影响微生物限度方法验证的准确性和可靠性。

一般来说，在加入吐温80等辅助分散剂后，需要进行适当的振荡、搅拌或超声等操作，以促进微生物在样品中的均匀分散，然后再进行后续的处理和检测。同时，具体的操作方法和静置时间等应通过验证试验来确定，以确保所采用的方法能够准确、可靠地检测出样品中的微生物限度。建议参考相关的药典规定以及具体的微生物限度检测标准操作程序，并结合实际的验证试验结果来确定合适的操作步骤和时间。

玲ckehchhh

鬼使神差 发表于 2025-4-16 13:43
加了吐温80后仅静置几分钟取上清液进行验证通常是不可以的。

吐温80主要是作为表面活性剂来增加原料药水 ...

谢谢老师，辛苦您了。知道了

minesters

可以但是处理过程和静置时间需要验证，25版药典9202指导原则里面提到了“当使用自然沉降法获得上清液作为供试品溶液时，需考虑沉降时间对微生物回收的影响，必要时可在方法中明确自然沉降时间。”

1599288795

1、注意温度80的浓度，这是为了避免抑制性；
2、加吐温是为了确保分散均匀性，所以混匀操作是肯定要有，静置或不静置或静置的时长需要测试其回收率；

Nefert

我记得我以前做的好像是平皿法