各位老师，请教一下有关薏苡仁蒸发光含量测定遇到的问题？

EI11

在做薏苡仁时遇到了很多问题，请教各位老师指点一下
1：进样之后，对照品一针比一针大，要很久才能稳定。
2：色谱峰或目标峰很容易分叉（载体流速由3变到2.5也不行）
3：对照品和供试品平行线不好，RSD≥2%

条件如下：蒸发光检测器：E800 ELSD 赛那尔sainaer流动相：乙腈:二氯甲烷=65:35
流速：1ml/min
柱温:30℃
漂移管温度：75℃

载体（氮气）流速：3.0l/min
色谱柱：月旭xtimate c18

EI11

流动性是混合

WANDEQIAN

到底是ELSD的问题还是液相的问题，还是直接联系厂家工程师比较快，

世间始终你好

你现在在用**ELSD法测定薏苡仁中的成分**，遇到的问题其实在用ELSD检测中非常常见，尤其是在进样稳定性、峰形、重复性方面。你目前的问题总结为以下几点，我们逐一分析，并给出**优化建议**：


**问题1：对照品进样一针比一针大，要很久才能稳定**

原因分析：

1. **ELSD检测器本身存在响应漂移**，特别是在系统预热不够、氮气不稳定或流动相比例变化后更明显。
2. **对照品浓度不均一或对照品易吸湿/易挥发/易沉淀**，导致每次进样浓度略有差异。
3. **系统未达到稳定状态（如温度、压力）**，特别是漂移管温度未恒定。

优化建议：

* 确保**系统充分平衡**，至少运行30min以上，ELSD必须预热完全，直到基线非常平稳。
* 对照品稀释后应**短期内使用**，可尝试每次新鲜配制、避光避潮保存。
* **用等体积“假进样”几针冲系统**，使柱子适应样品基质及流动相。
* 注意：ELSD极易受柱前压波动、氮气流速微变影响，**压力变化期间不要进样**。



**问题2：色谱峰（特别是目标峰）分叉**

原因分析：

1. **样品溶剂与流动相不相容**，导致样品在线析出或重组（在反相条件下很常见）。
2. 柱温太低或柱效下降，导致分离能力不足。
3. 样品中可能有多个共洗脱组分，峰未能完全分离。
4. ELSD响应不均匀也会加剧“假分叉”现象。

优化建议：

* 保证样品与流动相**极性相匹配**，即尽量用流动相或近似溶剂溶解样品（如乙腈:二氯甲烷=65:35）。
* 增加**柱温（如升到40°C或45°C）**，可改善峰形和溶解性。
* 检查色谱柱使用寿命，必要时**更换柱子或采用更短粒径（1.8µm）**
* 可试试流速调为**1.2ml/min** 或 **缩短柱长**，测试分离效果。



**问题3：对照品和供试品平行性差，RSD ≥2%**

原因分析：

1. 样品制备不一致，溶解度或沉淀问题。
2. 进样体积微小，且ELSD响应非线性，导致误差放大。
3. ELSD本身响应存在较高RSD（相比UV法，2%可能是正常水平边界）。

优化建议：

* 对照品和样品一定要**统一溶剂**、**统一处理方式（如超声、过滤等）**
* **增加进样体积**（如10→20μl）或**提高浓度，减少进样误差**
* ELSD为**非线性检测器**，建议使用**对数或幂函数校正曲线**进行定量（R²一般不能用线性来判断）
* 若系统RSD控制困难，可考虑：
   改用HPLC-DAD法或HPLC-MS定量（若成分允许）
   或采用内标法提高精度



综合优化建议表

| 项目      | 当前情况          | 优化建议                        |
| ------- | ------------- | --------------------------- |
| ELSD稳定性 | 漂移明显，进样不稳定    | 系统预热30–60min，初始空针平衡3–5针     |
| 流动相     | 乙腈:二氯甲烷=65:35 | 尝试增加乙腈比例（如70:30）或加入异丙醇改善溶解性 |
| 柱温      | 30°C          | 尝试升至40–45°C                 |
| 氮气流速    | 3.0 L/min     | 可试调至2.8或3.2试验优化，观察对分叉的影响    |
| 峰形      | 分叉            | 保证样品充分溶解、过滤，换柱尝试，调整温度       |
| RSD     | ≥2%           | 优化样品前处理、进样浓度、校正方法（建议用对数函数）  |

小鱼吃虾

流动线预先混合，单开一个泵，基线平衡60min以上。