关于银杏叶片总黄酮的含量测定

shenzhidao319

大家有做过银杏叶片的么？有遇到过总黄酮含量在各批次内（同一批不同的人检测或同一个人不同时间检测）各批次间（用的都是一批的银杏叶提取物原料，投料也完全一样）波动较大（52mg/g-57mg/g）的。
我们目前分析可能有两个原因：1、原料；2、检验方法
大家帮我分析分析，为什么会出现这么大的波动？

色谱那些事

检验方法的可能性更大。你必须要确定每次检测的色谱柱完全一致。不同厂牌的色谱柱检测黄酮类成分，可能会出现不同的结果。另外还要考虑流动相设计的合理性了。

wadyc

同意楼上的看法　　　　　　　　　　　　　　

shenzhidao319

色谱那些事 发表于 2012-12-11 17:04
检验方法的可能性更大。你必须要确定每次检测的色谱柱完全一致。不同厂牌的色谱柱检测黄酮类成分，可能会出 ...

我们是按照10版药典的方法检测的，而且色谱柱是同一根

色谱那些事

如果混合对照品图谱每次的保留时间、分离度、峰形、峰面积等参数都基本一致，而最终含量测定的结果不同，那就是样品配置和样品前处理的问题了！
看了一下标准的前处理方法，觉得用25%盐酸水解这一步出问题的可能性比较大。个人建议操作步骤改为：精密量取续滤液10ml,精密加甲醇10ml和25%盐酸5ml,回流30min.
另外，25%盐酸挥发性极强，建议临用新配。
总之，我认为盐酸的浓度必须要准确控制，否则，可能会影响水解效果，导致测定结果有偏差。
最后一个建议：所有实验器皿必须确保无金属离子残留（器皿经洗液浸泡、自来水清洗后，用蒸馏水认真多清洗几遍），否则会导致含量测定结果偏低！

shenzhidao319

色谱那些事 发表于 2012-12-17 14:51
如果混合对照品图谱每次的保留时间、分离度、峰形、峰面积等参数都基本一致，而最终含量测定的结果不同，那 ...

嗯，说的太有道理了，我回去查查看

WLQZLL

谢谢LZ分享