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过滤纸板减少气血康口服液沉淀的作用研究
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沈阳市长城过滤纸板有限公司技术部王闯
目的：考察过滤纸板对气血康口服液澄清度的改善情况，对皂苷类、蛋白质和多糖含量的影响。方法：采用SCP-312和SCP-336号过滤纸板过滤气血康口服液，高效液相色谱法测定滤液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量。
微粒聚集是发生沉淀的主要原因。微粒以蛋白质为核，多糖为壳，形成表面带有负电荷的核-壳结构。中药口服液中，大微粒由小微粒聚集而成，数目较少，而小于2μm到纳米范围的小微粒数较多。首先聚集产生沉淀的是大微粒，聚集的更明显，产生沉淀。其次，小微粒再聚集成大微粒，产生沉淀。澄清度是制剂质量标准的评价水平之一，但不能一味的追求口服液的澄清度而忽略药效，在能减少口服液中沉淀的同时，最大程度的保留药物有效成分才是关键。在保证药效的前提下，减少口服液沉淀，是改善口服液澄清度的重要研究。
气血康口服液含三七、黄芪、人参、葛根四味中药，皂苷类的主要有效成分为三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1，放置一定时间产生沉淀。过滤是制备澄清液体制剂必不可少的工艺流程之一。纸板过滤能够将中药口服液中大于孔径的微粒除去，减少沉淀，但不能拦截且去除小微粒。这些纳米级小微粒的稳定性相对较高，出现的沉淀现象并不明显。因此，用纸板过滤去除大于2μm的微粒，沉淀就会明显的减少（图1），获得澄清、纯度较高的制剂，更有利于制剂储存的持续稳定性和减少不良反应的产生。所以要选择适宜的过滤方式，使液体制剂澄清。本研究采用过滤技术，用不同的过滤纸板对气血康口服液进行过滤，测定过滤后口服液有效成分、蛋白质和多糖成分的含量，考察纸板过滤技术用于口服液澄明度的可行性，为解决口服液沉淀问题提供实验依据。
图1 A：核-壳结构；B：小微粒不断聚集形成大微粒；C：过滤
1、气血康口服液的过滤
使用配备312、336号过滤纸板的板框过滤机，将滤纸片置于滤板上，压紧。将口服液原液从进料口倒入，弃去刚开始滤出的带有大量泡沫的滤液，收集续滤液备用。完成过滤后倒入纯净水洗涤板框压滤机，洗至滤液无色即可，开始过滤，收集滤液。
2 含量测定
2.1色谱条件
C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm）；流动相乙腈（A）-水（B），梯度洗脱（0-12min，19%A；12-75min，34%A）；流速1.0mL/min；柱温30℃；检测波长203nm；进样量10μL。
2.2对照品溶液的制备
精密称取三七皂苷对照品R10.0037g，人参皂苷对照品Rg10.0056g和人参皂苷对照品Rb10.0066g，将3种皂苷放入5ml的容量瓶中，加入甲醇完全溶解至刻度线，得到质量浓度为0.74mg/mL的三七皂苷R1、11.12mg/mL的人参皂苷Rg、1.32mg/mL的人参皂苷Rb1的对照品溶液
图2
2.3 过滤液的成分测定
精密吸取312和336号纸板过滤的气血康口服液1ml，HPLC法分别测定口服液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量，结果如下：
表1 长城纸板过滤前后三种成分含量（mg/ml）
表1
图3 长城纸板过滤前后三种成分含量（mg/ml）
如图3和表1所示，与过滤前原液进行对比，运用SPSS17.0进行统计学分析，312号纸板过滤前后三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量无明显变化，过滤后含量不变。
2.4 多糖与蛋白含量测定（上期文章有检测方法与相似结论，此不做过多说明）
3、 过滤
使用312、336号过滤纸板过滤气血康口服液，发现过滤后人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量无明显变化、蛋白质和多糖含量同样无明显差异。有微小减少，考虑是滤板吸附、滤饼截留的影响。用考马斯亮蓝法对气血康口服液原液和过滤液进行蛋白质含量的测定，发现过滤前的口服液蛋白质含量比过滤后的口服液蛋白质含量高，但是两者相差不大，这表明用纸板过滤气血康口服液对蛋白质的含量影响较小。用苯酚-硫酸法对气血康口服液原液和过滤液进行多糖含量的测定，发现两者相差不大，这表明用纸板过滤气血康口服液对蛋白质的含量影响较小。过滤得到澄清的液体制剂，保证制剂高水平固然重要，但应综合考虑有效成分的分子量、粒径、理化特性，选取适宜的过滤方式，在主要有效成分含量影响较小的前提下进行过滤。
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