【HPLC异常问题及解决】异常11：峰高改变以及峰的选择性降低

北重楼

峰高改变以及峰的选择性降低

峰高降低给人的第一感觉是分析物质的浓度发生了变化或者进样量发生了变化，从指南中给出的原因看，可能是样品发生了降解，所以可以通过配制新鲜的样品或标准品，确认是否为样品本身的问题，如果标准品峰的高度还是会有变化（有明显的降低），则需要考虑是柱子的损坏造成的峰高改变。

不正确的进样方法，比如进样环没有被充分充满，通常应该采用2-3倍的进样环体积的进样量，或者进样时的溶液中混了气泡、或者自动进样的过程中样品瓶中的溶液不够，或者进样针清洗液如果与样品反应，产生沉淀也有可能会导致峰高的变化。

进样器出口与色谱柱入口如果有泄漏的情况也会导致峰高的改变，这种情况下就需要检查管路系统的连接是否正常，这与之前异常10：峰展宽时的管路泄漏的位置是不同的。

从检测器的角度来看，检测器设置的错误，灯的能量的衰减以及检测池的污染也都会导致峰高的改变。

峰的选择性下降第一需要考虑的是流动相的问题，比如流动相组分中有机溶剂的组份发生变化，pH或者添加的溶剂发生变化，在这种情况下需要检查一下流动相的配比。同时，如果更换了色谱柱，往往也会改变色谱峰的分离行为，尽量专柱专用以获得更好的分离重现性，固定相的脱落或者污染也会导致色谱柱分离行为的改变

配制样品的溶剂如果不正确，柱温度的变化也会导致选择性的下降。   转载于pharmaGMP

静水蓝心

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qiuzhenzhe

哥哥，讲的很好，如何跟踪呢？