| 第29章在受监管的环境中积分 当在一个规范的实验室工作时，一些关于色谱峰积分的问题不断被提出。色谱师可以手工对色谱峰进行积分吗?如果他们可以手工积分，什么时候可以呢?另外，如果他们可以手工积分，什么时候不应该这样做?实际上，手工积分的定义是什么?这些是色谱数据系统必须回答的关键数据完整性问题。重要的是色谱积分得到充分的控制，并在法规遵从性和色谱科学之间取得平衡。 29.1监管者想要什么? 29.1.1美国GMP 21CFR 211 -实验室控制211.160一总体要求【1】： (b)实验室控制应包括建立科学合理和适当的规范、标准、抽样计划和测试程序，以确保成分、药品容器、瓶盖、过程中材料、标签和药品符合适当的均一性、效价/含量、质量和纯度等标准。 29.1.2美国和欧洲药典 虽然，USP在色谱通用章<621>【2】，EP在色谱分离技术上的2.2.46章【3】中对色谱进行了控制，但没有提及自动或手动积分。 29.1.3 FDA工业生物分析方法验证指南 FDA关于生物分析方法验证的行业指南中有一节涉及样本的常规分析，其中提到了样本数据积分【4】: ●应该先建立SOP或样本数据重新积分的指南（译者：指对于CC-色谱分析而言）。 ●本SOP或准则应定义重新积分的标准以及重新积分的方式。 重新积分的理由应该清楚地描述和记录。 ●原始和重新积分的数据应该形成文件并报告。 在本文件后面关于例行研究报告的一节中有一节关于重新积分数据的文件【4】，其中一部分的需要是: ●用于再积分的方法， ●重新积分的原因， ●重新积分的请求者和授权重新积分的管理者。 ●临床或临床前样本的重新积分仅应在预先确定的SOP下进行。 2013年，美国食品和药物管理局(FDA)发布了一份用于更新样本数据积分的行业指南的修订草案——职能机构对这个问题的关键要求基本上没有改变——但是对上面列出的内容进行了重新安排，并增加了需要保留来自CDS的审计跟踪信息的要求【5】。 29.1.4 EMA生物分析方法验证指南 2011年《生物分析方法验证指南》第5.5节中的EMA(欧洲药物管理局)以精确的方式涵盖了积分的主题【6】: ●色谱积分和重积分应在SOP中进行描述。 ●任何偏离本SOP的地方都应在分析报告中进行讨论。 ●色谱积分参数，在重新积分时，初始和最终积分数据应在实验室予以记录，并应根据要求提供。 这是一个比在前一节FDA的法律方法更简单和更少官僚程序的方案。 29.1.5监管概述 尽管现在在GMP下工作的实验室对数据完整性有很大的兴趣，但无论是明确的法规还是监管指导都很少能帮助色谱师。特别是在第7章中提到的最近的警告信中，CDS已经成为许多伪造案例的中心。 根据GMP法规，只有美国GMP要求分析程序的科学性(也包含在ICH Q7，即欧盟GMP第二部分)，这将含蓄地包括积分的程序涉及色谱。此外，在FDA的法规遵循政策指南7346.832的目标3下，有数据完整性审计用于批准前检查。 欧盟GMP和所有GLP法规都对手工积分问题只字不提【7】。 但是，有一个领域的管制人员一直积极从事手工重新积分的工作，那就是对非临床和临床研究的样品进行生物分析，以便注册药物。虽然FDA和EMA都允许重新整合色谱，但必须在受控条件下、也必须在最终报告中报告包括：谁授权的重新积分、最初的结果以及后续积分的审计追踪和重新积分理由等内容。就我个人而言，欧洲的做法似乎更好，因为FDA的指导过于官僚，而且目前的CDS申请中没有记录此类请求的功能。 如果手动积分是一个主要的监管问题，为什么在GMP中没有具体的监管指导来帮助我们，而是在GLP中?受监管方必须证明手动积分的科学性和合理性，这是监管的要求：你能在良好的色谱科学的基础上为自己的行为辩护并遵守规定吗? 29.2为什么控制色谱积分? 色谱峰的积分是从样品提取物的分析过程到报告结果的计算的重要环节。然而，在一些实验室中存在着各种各样的问题，从糟糕的、不称职的和/或不科学的色谱积分工作实践，到弄虚作假和欺诈。这些糟糕的做法几乎在每个大陆的每个国家都可以看到，它不局限于一两个国家或一个大陆。 29.2.1 FDA警告信摘录 对监管部门来说，一个棘手的问题是色谱的人工积分。如果在检查过程中可以看到，你几乎可以看到检查员大脑中的轮子在机械精度上不停地转动，并思考他们是否在测试是否符合要求?这可以从FDA 483的观察报告和警告信中的一些引用中看到，以下是一些例子: 在2014年FDA对英国一家实验室的检查中，FDA 483对不良数据管理实践的观察表明: 不存在描述如何执行手动积分的过程。 以下FDA警告信中出现了涉及伪造的更严重的不符合情况【8】: 在2006年的Leiner Health Products, FDA调查人员发现: ●此外，我们的调查人员记录了许多大量操纵数据的案例，但没有解释操纵数据的原因。●这一操作将包括改变积分参数或重新标记峰，这样以前积分的峰将不会被积分并包含在杂质的计算中。 ●没有标准操作程序(SOP)来描述允许人工积分的策略、标准实践和环境【9】。... ●没有关于手动积分理由的文档。 ●虽然色谱图显示为人工积分，但有标记和签字的分析检查表表明没有人工积分。我们提醒您，实验室应该建立一个关于手工积分的程序，并确保这已得到遵守，这已成为一种迫切的期望【10】。 ●贵公司重新分析多个色谱图，以确定标准结果;但是，没有保留重新积分的参数。【11】。 29.2.2色谱积分的控制方法 从上一节可以看出，积分需要一个包含手工积分的书面过程。当手工积分被执行时，需要一个程序和理由来解释为什么会发生这种情况。 然而，我们需要考虑一些基本的积分色谱峰之前，我们可以看看手动积分和围绕它的监管指南。原因很简单，如果积分参数设置正确，色谱是可以接受的，那么就不需要手动重新积分峰。 第一个实例中的所有积分必须自动执行。然而，我们也需要承认色谱系统本质上是动态的，在运行过程中分离可能会改变，因此获得正确的整体积分可能是一个平衡的过程。对于由许多样本和注入组成的长时间的总体运行时间来说尤其如此（译者：复杂的梯度洗脱）。 监管机构对只关注手工积分程序的要求是错误的。相反，需要的是色谱积分的SOP，其中手工积分是一个重要的子集。这是小实验室警告信中注明的具体要求【10】。 29.3积分的基础知识 在我们讨论如何控制和管理手动积分之前，理解色谱积分本身的基础知识是很重要的。关于积分这个主题，最好的书是Norman Dyson写的，虽然第二版出版于1998年，但如果你想了解色谱积分，它仍然适用并强烈推荐。关键的积分参数如表29.1所示，主要的积分参数如下。注意，一些CDS供应商可能用不同的名称来称呼这些参数，但其功能与表29.1中的基本相同。 表29.1用于峰值采集和测量的关键CDS积分参数。 | 参数 | 功能 | | 采样率(峰值宽度) | •采样率(赫兹，每秒的数据点数)，探测器信号由CDS A/D单元按特定方法采样 •不管采样率设置如何，一些CDS可能以100 Hz的高固定频率获取(参见聚束-平滑) •更快的色谱，如UPLC或毛细管GC需要更高的采样率 | | 聚束(平滑) | •使用几个连续的数据点来获得平均时间片值，相当于较慢的采样率 •也可用于降低色谱中的噪音 •使用cds软件而不是通过A/D单元实现 | | 峰值阈值(检测阈值或斜率灵敏度) | 用于确定是否检测到峰值的参数。峰值启动是在超过所选的值或斜率时确定的(启动阈值) •选择过低的值会导致背景噪声的积分，或选择过大的值会使噪声最小化，但也会导致未识别的和积分的小峰值 | | 基线漂移度 | •确定基线与峰值结束时的原始位置之间的距离 | | 最小面积(峰面积起计点) | 设置报告色谱峰的最小峰面积或高度。该参数独立于数据采集和积分方法，仅适用于积分峰面积。 | | 禁止积分 | •在每个注入的特定时期禁用积分。通常在注射开始时使用，以避免溶剂前端效应或基线扰动 •注意，抑制期结束后的第一个信号通常被定义为基线，不管发生了什么 |
图29.1峰值积分的关键参数。 如图29.1所示，当色谱数据系统(CDS)使用模拟到数字转换器(A/D)对检测器输出进行采样时，色谱积分就开始了。CDS中的积分方法决定了探测器信号的采样频率、每次注入的收集和分析运行时间。通常在运行结束时，依赖于CDS，积分方法或处理方法将自动应用于数据片文件，以计算峰值面积或高度。处理方法将包含感兴趣峰的标识及其预期的洗脱时间窗口。这些数据文件及其积分构成完整数据、原始数据或分析的主要分析记录的一部分，如第27章所述。这三个术语将在本书第27章中讨论。 积分中最重要的两个参数是采样率和峰值阈值。在组合中，它们确定用于测量峰值的切片，但也抑制噪声，以便更好地测量峰值【12】。 峰值宽度或采样率设置决定探测器输出采样的频率，直接影响峰面积测量的精度。如果采样速率过慢，可能会导致积分丢失一个小的快速洗脱峰或两个峰之间的一个谷。相反，太快的数据采集速率可以通过在CDS软件中进行数据平滑来管理。通常，你应该采样一个峰值至少15-25倍的宽度，以便它可以准确地积分，例如: 传统的HPLC通常需要0.5-1 Hz的采样率，较快的毛细管气相色谱采样率在5 - 20hz之间，UPLC需要20- 50hz之间的采样率。 CDS中的大多数A/D单元的额定采样率高达100 Hz，在某些CDS应用程序中，数据采集率为100 Hz，数据自动按设定的数据率进行分组。 峰值阈值是将峰值的开始和结束与基线噪声区分开来的设置。在峰值开始积分法中，它是基于探测器信号高于预置值时的变化率，在峰值结束积分法中则是基于探测器信号低于预置值时的变化率。这需要仔细设置，因为如果基线是有噪声的，那么噪声将被检测为峰值，或者如果设置得太大，积分将由于阈值未触发而错过小峰值。同样的过程发生在峰值末端，但如果阈值较低，则会计算出太多的峰值尾迹。相反，如果阈值设置得过高，则峰值提前结束，从而低估了峰值的面积。 一旦检测到波峰，下一步就是确定它何时结束。通常，这是当信号返回到峰值开始之前的基线，但是如果有几个峰值被洗脱或基线上升，那么信号将不会返回到基线原点。因此，基线漂移度决定了基线与原始位置的漂移距离。这与决定其漂移速度的峰值阈值形成对比【12】。 从这一点和Dyson的书中更详细的讨论，我们可以引出色谱积分的三个基本规则【12】: ●规则1:不要使用默认的积分参数。 确保每一组积分参数都是针对一个单独的分析过程定制的，不要使用一种适用于比尔-朗伯定律的方法来保持样品和标准的一致性，否则就无法进行吸光度和浓度的基本比较。 ●规则2:CDS的功能并不是为了弥补你糟糕的开发或分离方法。 许多实验室都相信CDS可以用来挽救分析运行，但事实并非如此。稳健和有效的方法应该减少或消除这个问题。FDA数据完整性指南问题14 的预期是色谱方法应该是可靠和稳定的【13】。 ●●●规则3:了解CDS上发生了什么。 仅仅因为你从CDS上得到一个数字，你不必总是相信结果。用你的眼睛去看，用你的大脑去思考。例如，看看积分代码(如BB或Bv)，这些是预期的吗?基线的位置是否符合预期?在整个过程中，保留时间和峰值形状是否一致?是否在不应该进行人工积分时进行了人工积分? 为了完成CDS积分的概述，请注意Dyson所说的:改进色谱必须始终优先于设置CDS: 如果色谱师发现需要不断地调整参数以实现对标准样品的一致测量，这就清楚地表明需要做更多的工作来控制仪器和分析【12】。 从本质上讲，类似于“雷纳”式的不合规可能性正在迫近（译者：指2007 年FDA 分别给LeinerHealth Products 发出警告信的事件）【8】。这是因为过度使用人工积分来弥补方法开发或色谱分离的不足会增加数据完整性的风险，并增加生成、审查和发布结果的时间。 29.4手动积分如何导致了造假？ 用手动积分来进行数据造假的情况正在增加，但是主要有两种途径： 使用人工积分来伪造色谱数据的方法有很多，但主要有两种: ●削峰——在积分上放置基线以减少峰面积，以增加样品中的分析物量(只有标准被削去)或减少报告的分析物量(通过削去样品而不是标准)。在图29.2的第一洗脱峰上，行1显示自动综合峰基线，行2显示削峰。 ●峰值增强——调整积分的基线，以增加峰值的面积。同样，对标准上的样品区域的增强可以增加样品中的计算量，或者如果需要减少，则只执行对标准的增强。 图29.2 调峰(2)和调峰(3)与正常积分位置(1)的比较。 图29.2第3行显示了如何在色谱图中增强次要或第二洗脱峰。 图29.2显示了夸张的峰值增强和剃除，但有时所需要的只是一些小更改，以使不合格的批符合标准。因此，欧盟GMP第6章所要求的趋势分析结果，包括质量控制，以突出超出预期(OOE)和趋势(OOT)的结果，以及超出标准(OOS)的结果。当结果超出趋势或预期时，可能会定义为单个分析师的行为，这可能需要更仔细的检查。 29.4.1揭露操纵 检验员和审核员将寻找一些因素，以确定是否存在未经授权的对色谱峰的人工积分和操作。这些还需要在第24章讨论的复核人审查或在第33章提出的数据完整性审计的一部分: ●发现无法跟踪或检索的手工积分。色谱分析人员应该能够证明，如果对运行中的数据文件进行重新处理，也可以得到相同的结果——如果不能快速完成这项工作，并且检查人员正在检查任务，则会发出警告。与此同时，可能还会有一名检查人员查看CDS审计跟踪是否已被暂时关闭以进行伪造。 ●没有电子数据。将原始数据与已删除或未保存的电子记录结合在一起，以纸张为中心，意味着无法对数据进行再处理并确认结果。伪造的问题被提了出来，实验室正滑向合规地狱。对于同一批次的标准样品和未知样品，或同一批次的未知样品在分析批次中重复注入时，积分参数是不同的。 ●系统中的审计跟踪在几分钟后被关闭，然后又被打开的证据:哪些更改没有被记录? 29.4.2是什么缺失了? 在阅读GMP和GLP法规、欧洲和美国药典关于色谱法的总章和三份生物分析方法验证指南文件时，发现近乎于人为误差的缺少一个基本元素。唯一讨论积分的法规出版物是生物分析方法验证指南文件。然而，这三种出版物的重点都是验证方法的应用，而不是分析方法本身的验证。 任何涉及色谱分析的分析程序的验证都必须包括分析过程中预期的积分参数，包括可能应用人工积分的地方。值得注意的是，Martin等人在2012年发表的关于生命周期方法的USP修订版论文中并没有讨论是否需要包含积分参数【15】。 29.4.3为什么没有手工积分的定义? 到目前为止，我们已经讨论了关于峰值积分的监管问题，然后讨论了主要的积分参数和积分的三条规则，这样您就有机会自动积分您的峰值，而不需要手动干预。然而，假设，只是假设，你需要;现在我们需要将注意力转向手动积分。正如我们从法规引用和生物分析指南文件中所看到的，我们需要的是一个SOP来控制、管理和授权积分——自动和手动两者都需要。 在理想的情况下，人工积分是有定义的。然而，无论是在Dyson还是在任何监管网站上，我都找不到可用的手工积分定义。这是Hill等人提出的观点【16】，他们讨论了手工重新积分的范围和术语，并得出结论，必须就定义达成共识。他们指出，问题在于不存在共识。 这就提出了一个重要的问题:如果我们不能定义手工积分—我们如何编写积分的SOP呢? 29.5色谱积分SOP的范围 本着早期先驱者的精神，本章将介绍一种以流程图形式编写SOP的可能方法，该流程图将考虑自动和手动积分的一些(但不是全部)选项。当然，作者对先锋的一个定义是寻找新的和奇异的死亡方式（有一点恐惧）。然而，本节提供了一个合乎逻辑的贡献，讨论什么是手工积分，并希望就定义可以达成一致，以满足监管机构和色谱师。 在这个讨论中，我们必须在健全的科学与法规遵从性之间取得平衡。因此，让我提出一个问题——哪个更糟:当你知道结果是错误的时候不重新积分，还是当你在样品色谱图中看到一个未知的峰时接受错误的结果?你看到这个困境了吗?我们知道这两种情况的结果都是垃圾，但由于缺乏弹性的程序或对规则的恐惧，你无法做出正确的科学判断。 首先，让我们考虑一个“不允许手工积分”选项。这是一个站不住脚的情况，特别是如果一个受管制的实验室使用最新开发的方法，分析杂质的定量或检测限度接近基线噪声或调查产品的稳定性。在这些情况下，手工重新积分在科学上是合理的，只要它包含在积分SOP中，就可以预防相关问题。全球生物分析联盟已经发布了小分子分析的推荐协调实践，其中包括关于色谱积分的评论，指出【17】: 关于在分析验证中更严格的控制和潜在的“锁定”色谱积分参数的问题已经讨论了很多，人们错误地认为这将在某种程度上提高质量。 然而，必须承认色谱分析是一个动态的过程，在分析的整个生命周期中都面临峰积分的变量。LC-MS/MS(之后的峰值积分)会受到仪器响应变化的影响(仪器制造差异、老化、灵敏度等)和色谱性能(峰值形状变化、噪声等),因此,色谱积分参数也必须是固定的说法是科学的无效假设。 因此，建议将分析验证中使用的积分参数作为任何后续运行积分的初始指导，但最终使用的积分应充分表征兴趣峰值，并一致应用于校准、QC和运行中产生的样品。 Hill等人发表的关于生物分析中人工重新积分的论文也是该主题的推荐读物【16】。James等人注意到，积分程序应该是客观的、不偏倚的和可防御的，这意味着，重申了上面的GBC评论，在样品注入之间应该有积分的一致性:标准、质量控制和样品注入必须被同等对待【17】。 29.5.1积分决策流程及决策树 考虑积分的建议流程图如图29.3所示。它从色谱运行的完成和原始处理方法对峰的自动积分开始。结果的色谱图由负责分析的色谱师进行评审，以确定保留时间和峰形是否符合预期，单峰（全部峰）已正确识别，基线位置是否符合分析程序的要求，样品是否与标准一致。个别实验室可能还希望应用其他标准。我们现在面临一个决策点:这次运行是否可以接受?如果是，则计算个别结果和报告值，一切正常。此时的所有数据都是由CDS自动计算出来的，色谱师只是确认软件的操作是否符合预先定义的期望。 图29.3 手动干预和手动积分的建议流程图。 然而，如果积分是不可接受的，那么我们将进入第二个决策点。这就要求是否允许在这个分析过程中使用手工积分(无论这个术语可能包括什么)。如果没有，下一步就是实验室调查。对于非手工积分，我们可以考虑哪些方法来可以适用?可能是对原料药成分的测量或对成品中活性成分的注册方法。一个可能应用场景是：如果这些峰不能正确地积分导致你失控了?当我们完成对流程图的讨论后，我们将考虑这是否可行。 我认为，在以下情况下，必须明确禁止手工积分: ●自动积分后，有可接受基线到基线拟合的对称峰。 ●提高或修整峰面积以满足SST验收标准或允许运行以满足测试标准。 现在我们来看看什么是“手工积分”。图29.3展示了我选择讨论的三个选项，根据所执行的工作，您的实验室SOP可能包含更多的领域。您需要的结果是一致的和适当的人工积分，这是科学上站得住脚的。因此，您需要避免出现积分不一致或不适当的情况。 29.5.2手工干预与手工积分 您将在图29.3中看到，选项1和2显示为手动干预，选项3显示为手动积分。让我说明一下我的理由。 ●选项1:峰从窗口滑落，没有被正确识别。自动积分是可以接受的，所需要的只是更改积分方法和再处理中的峰值窗口。这是人工干预中最简单的情况。这种方法不会改变峰面积，并且积分仍然是自动的。 ●选项2:在积分或处理方法的参数需要进行调整，然后应用于所有的进针运行。例如，可以通过改变峰值阈值或最小面积来减少基线噪声的影响。在此选项下，峰面积可能会改变，也可能不会改变，但是分析师不会手动设置基线。 ●选项3:如果要进行杂质分析，则需要由色谱师手动放置基线，以确定运行时间较晚的峰值或噪声。峰面积将因重新积分而改变。 请注意，图29.3中的三个选项显示在不同的级别上，这是我说明手工积分的方式。在第一种选择中，你可能认为是炼狱，第二种是地狱，而第三种选择是;你懂的。 选项1和选项2是人工干预，但基线位置由CDS执行，不受色谱师的影响。这些都是首选的选项，并且更容易从科学角度进行论证。选项3是其他所有方法都失败的情况下，一个色谱师通过单独的色谱图，在适当的地方重新定位基线。后一点很重要;这是一种科学判断的练习，需要得到积分SOP中的程序的支持。正如全球生物分析协会(Global Bioanalytical Consortium)早些时候指出的那样，监管机构也需要认识到，色谱是一个动态过程，随着时间的推移会发生变化【17】。 注:有些分离物本身不能自动积分，必须手动积分。例如造影剂，一些生物制品和一些复杂的尺寸排斥分离。但是，必须避免偏差和“试针”导致遵从性，因此在这些情况下，分析程序必须记录手动积分的理由。 29.6四眼原理应用于色谱积分 为了确保结果的正确性、数据的完整性和足够的质量，在一个规范的实验室中，所有的实验室程序都应该应用四眼原则。为了取得成功，需要将教育、培训和经验与CDS工作流程结合起来。这一节需要与第24章中的复核人检查一起阅读。 29.6.1主要目标是自动积分 让我们回到图29.3中的流程图。负责分析的色谱师负责根据分析程序设置色谱仪:仪器在校准范围内，功能正常。然后，系统为了运行分析进了行充分的平衡:如果有程序的允许话，注入一个标样可被用于检查分离能力和评估是否整个系统已准备好用于分析(这些注射是完整数据的一部分，需要报告，如第7章和第27章所述)。如果系统评估样显示出积分可接受，那么就可以在已知积分是自动的、可接受的情况下注入SST、标准和样品。 29.6.2次要目标是人工干预 如果自动积分失败，因为峰值已经从保留窗口滑出(手动干预部分中的选项1)。色谱师可以调整窗口和重新整合后，作为峰通过正确标记，但没有变化，因为峰面积不变。尽管这种情况毫无疑问会被FDA归类为“人工积分”，但是对感兴趣的峰值的实际测量并没有变化。这种情况应该归类为手动积分吗?在我看来，不，这是一种手工干预，而不是重新积分。这并不是一种文字游戏，而是一种试图根据零指导和多次引用来准确定义监管机构想要什么的手段。此外，由于对这个术语没有一致的定义，我们有一个问题——是否允许这样做?如果你能定义和证明这个方法，这将比什么都没有要好得多。 接下来，如果需要修改积分，程序是否允许这样做?如果是，则由色谱师根据图29.3中的选项2进行更改。理想情况下，系统适用性样、标准样和QC样品应在整个测试过程中以相同的方式积分。 29.6.3当其他一切都失败时——手动积分 在或接近定量限(LOQ)或复杂混合物的极限时，可能需要手动积分。这是测试人员和审查员必须保持高度警惕的地方，因为这是审查员或审核员可以暗示一个样本正在被“测试”以符合要求的地方。 29.6.4有效成分和杂质的定量方法 让我们来看看在一次运行中，当考虑运行效率和分析不同的材料类型时可能出现的不同情况。在这里，活性成分和杂质可以在一个单一的分析程序中进行分析。虽然该方法对这些不同的分析物进行了验证，但在色谱中可能存在需要不同积分参数的差异。在这些分析方法中应该有明确的说明，即活性峰不能人工积分，只有杂质峰可以。 这种情况不能与测定活性药物成分(API)的样品和测定稳定性样品的情况相混淆，后者的方法有不同的目的，例如测定纯度和降解度。也许数据完整性的案例应该胜过操作效率，并且最好将不同类型的分析过程分开? 29.6.5积分一致性和数据完整性的程序和培训 色谱积分的整体程序应确保色谱师在整个实验室的工作始终如一，因此必须对分析人员进行以下培训: ●使用科学、合理和透明的流程进行人工积分。我们正在研究积分技术在所有色谱仪之间的一致性，以确保方法的一致性：可以通过CDS提供信息，将方法和色谱图复制到培训项目/目录，并允许色谱师在培训时积分相同的文件。 ●培训的一个结果是，经过培训的色谱师在手工积分峰时，会考虑在哪里放置基线，从而使峰符合科学的要求，并符合实验室的程序。 ●培训的另一个结果是，所有人都必须明白，SOP或分析程序范围之外未经授权的手工积分被视为数据伪造。 ●积分培训还将为实验室管理提供理解人工积分如何助长OOS结果的方法。如果手动积分小峰值时存在较大的扩展，这可能意味着手动积分可能会产生意想不到的后果。 ●通过人工干预或人工积分对运行进行再处理的次数越多，就会吸引越多的质量保证和监管审查，即“红旗/红牌”的规模越大。不幸的是，大型的“红抹布”并不能有效地阻止监管机构的“大牛们”。 29.6.6积分的复核人审查 在任何涉及色谱数据的分析程序中，复核人审查必须着重于以下方面: ●目视检查所有运行中的色谱图是必不可少的。如果可行，使用CDS的功能进行透视，或用偏移量透视所有批次的色谱图，以查看分离的一致性。 ●色谱图是否与分析程序中所示的预期分离一致? ●峰积分是否如分析程序中规定的那样? ●在允许积分和应用了手动更改的情况下，它们在整个运行过程中是否一致? ●如果个别色谱图有特定的人工积分，是否有文件证明基线定位的合理性，或原始分析人员在审计过程中对积分参数的更改? 最后，色谱积分应包括在色谱数据系统的数据完整性审计和定期审查中，以确保在操作使用中培训和程序得到遵守，这将在第33章进行更详细的讨论。 参考文献： 1. 21 CFR 211 Current Good ManufacturingPractice for Finished Pharmaceutical Products, Food and Drug Administration,Sliver Spring, MD, 2008. 2. 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发表于 2023-8-4 10:14:56
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