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楼主: 龙猫_OZq5F
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[检验及监测] 菌种使用问题

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发表于 2016-6-1 09:55:07 | 显示全部楼层
龙猫_OZq5F 发表于 2016-5-31 22:25
五代使用的话是直接稀释?还是可以制备菌悬液?如果制菌悬液的话药典那里有说到不能用了哦

直接稀释
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发表于 2016-6-1 18:22:23 | 显示全部楼层
龙猫_OZq5F 发表于 2016-5-29 17:56
药典那里的意思不是只能传代到第四代码?用第五代的菌种,实际上菌悬液是第六代了,不是这样吗

对,只传到四代
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 楼主| 发表于 2016-6-1 19:14:43 | 显示全部楼层
zzw 发表于 2016-6-1 09:43
那得需要做效期验证吧,我们没有做,所以都是临用现配的

是的,有做效期验证。那你用之前每次都得要做一次计数是吗?菌种直接稀释使用 的话,那该支菌种使用多久呢?谢谢啦
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 楼主| 发表于 2016-6-1 19:15:17 | 显示全部楼层
zzw 发表于 2016-6-1 09:44
可是0代菌种能用的时间更久啊,应该没多少钱吧?大概几百块一支

2代都要几百块了,0代应该上千了
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 楼主| 发表于 2016-6-1 19:15:45 | 显示全部楼层
meizi138 发表于 2016-6-1 18:22
对,只传到四代

恩恩,谢谢
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药徒
发表于 2016-6-2 09:12:44 | 显示全部楼层
用完就得销毁了呀,我们每次使用之前都重新传代的
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 楼主| 发表于 2016-6-2 21:00:21 | 显示全部楼层
zzw 发表于 2016-6-2 09:12
用完就得销毁了呀,我们每次使用之前都重新传代的

恩恩,那得传好多支哦
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药徒
发表于 2016-6-2 22:32:28 | 显示全部楼层
二代可以直接用,但买来的二代量很少,只够传代用,传到四代就不用再传了,你四代配浓菌液就是五代了!
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药徒
发表于 2016-6-3 12:02:02 | 显示全部楼层
本帖最后由 罗罗 于 2016-6-3 12:03 编辑

从菌种保藏中新买来的是F0代,主种子和原始种子批开启后不超10代,从工作种子到生产用菌种不超过5代。2015版。
菌种传代.png
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 楼主| 发表于 2016-6-3 18:38:52 | 显示全部楼层
罗罗 发表于 2016-6-3 12:02
从菌种保藏中新买来的是F0代,主种子和原始种子批开启后不超10代,从工作种子到生产用菌种不超过5代。2015 ...

难得的信息,非常谢谢
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药徒
发表于 2016-6-4 15:57:27 | 显示全部楼层
龙猫_OZq5F 发表于 2016-5-29 20:49
可是每制一次菌悬液就是传代了呀,岂不是第六代了?

制备菌悬液不算传代。
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药徒
发表于 2016-6-7 18:38:49 | 显示全部楼层
龙猫_OZq5F 发表于 2016-5-29 17:56
药典那里的意思不是只能传代到第四代码?用第五代的菌种,实际上菌悬液是第六代了,不是这样吗

是这样的,斜面就只能用到第四代
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药徒
发表于 2016-6-7 18:40:16 | 显示全部楼层
zzw 发表于 2016-5-30 07:52
稀释不算传代哦,5代菌种稀释后还是5代,你们为啥不买0代菌种呢?效期长,还可以自己传代保藏

稀释虽然不算传代,但是接种后就增加了一代
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 楼主| 发表于 2016-6-7 22:49:56 | 显示全部楼层

恩恩,每次使用都做一次计数吗?
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发表于 2016-6-14 09:22:38 | 显示全部楼层
用四代工作菌种制备菌悬液(5代)用生理盐水稀释菌悬液(5代)直接使用,四代工作菌种多制备几管,可以用很长一段时间。
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药徒
发表于 2016-6-19 21:26:00 | 显示全部楼层
zzw 发表于 2016-6-1 09:43
那得需要做效期验证吧,我们没有做,所以都是临用现配的

那你们做验证或是做阳性对照的时候是怎么判断所加的菌数小于100cfu呢?
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发表于 2016-7-14 17:00:32 | 显示全部楼层
我们的对照菌从中检所买的是冻干菌种算0代,但是一般采购周期长,价格也比较贵,所以很少这么买,一般都是从市/省药检所购买,买来的是斜面,标的二代,大概200元/支。买来之后传代,金葡、枯草、黑曲霉之类石蜡液封2-8℃保存(保存1年基本上没问题),算第三代。使用前取出一支,传代扩增,算第四代,稀释成菌液之后用于工作。这样操作,基本上一年左右买一次菌种,反正在市药检所,方便,价格也不贵。
铜绿假单胞菌由于2-8℃保存会自溶,所以买回来传代(第三代),就在20-25℃培养箱里存放(大概可以放2个月左右,具体看菌体的生长及自溶等情况),使用前取出一支,传代扩增,算第四代,稀释成菌液之后用于工作。这样操作,基本上一年买2-3次菌种。
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