菌液制备

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    2015年版四部药典通则1105，菌液制备：取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。
    请问，这个新鲜培养物，如何理解？
    我个人是这样做的，先从工作斜面上挑取试验菌株接种至相应的增菌液体培养基中培养，制成浓菌液，然后十倍递增稀释，接至平皿中培养计数。我们这没有可以计数的仪器。
    请问，这样做可以吗？这样制备的浓菌液可以保存多久，这样算不算又传了一代？

aimee430

我们是制备一批菌种后，确定该菌种在固定接种量在一定培养时间后的菌浓度，然后根据该经验值，进行操作，同时做菌浓度复核。
如：传代了一批金葡菌，取其中1支，按0.5ml接种10ml培养基，培养3天，10倍梯度稀释，接种于平板，测试其浓度。反复3次，基本上想得到100CFU/ml，都在10000000（10的7次方，回复没法标上标，将就看）。那我们就在需要做实验的3天前接种金葡菌，实验的时候直接拿培养好的培养液进行10的7次方稀释液进行操作，同时将10的7次方稀释液接种于平板，同步做菌浓度复核（一般结果都在20-60CFU/ml）。这样下来，工作规律，菌液新鲜。当然，如果更换了菌种批号或者在菌浓度复核发现偏差比较大的时候，需要重新摸索稀释倍数。不过我们做了那么久，没发现什么问题。而且这样执行下来，我们的实验基本上都是有一定的周期性和规律性的，周几传菌，周几做实验、周几判定都相对固定。

阿容

我们也是这么做de

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你们有没有做这个浓菌液贮藏期的验证，如果做了，规定是几天。

thm

我们也是这么做的

zyh1982

学习了！！！！

高连海

算传代。你在斜面制备浓菌液分装时进行确认就可以了，根据经验选择三个稀释级计数（也可以两个或一个），大肠金黄铜绿基本10的7次方，枯草白念呢一般6或者7，黑曲霉菌悬液看你咋制备的。枯草孢子悬液生孢梭菌悬液同理。

絮絮冰子

工作斜面到增菌液体培养基中就算是传了一代，菌液可以保存多久要看具体的验证

nongzi

学习啦，非常感谢

18701266383

我这刷到的是不是太晚了  不知楼主现在怎么解决这个问题的   对于菌数计数这事 我查到用麦氏浊度定一个数量级  再用适当的浓度做母液进行稀释  这样不用培养做计数 很方便