【HPLC异常问题及解决】异常10：峰展宽

北重楼

继续上周的关于HPLC异常系列的话题，今天讲一下色谱峰为何会发生展宽……

概括起来，峰展宽的原因有以下几个方面：

• 流动相
  流动相的组成如果发生了改变，会导致分离效能的改变，从而有可能导致峰的展宽，同样，流动相的流速如果过低的话也会导致峰的展宽，这实际上也是分离不完全导致的。此外，从流动相的组成而言，当缓冲液系统的浓度过低时也会导致峰的展宽。分离效能的改变也有可能导致两个峰的重叠，从而表面上表现为峰型的展宽，这个与之前的峰的前延和拖尾都有相似之处。
  
  
• 色谱柱以及柱效应
  色谱柱产生展宽的原因无外乎之前的几个，柱头的空隙、色谱柱被污染、保护柱的损坏和污染、色谱柱的过载等，在前面的推送中都提到过，不再赘述。这里需要额外提出的是，柱温有时也会对峰的展宽有影响，通常是柱温度过低所导致的，通常情况下，柱温的上限是75摄氏度，或者遵循色谱柱供应商的建议。
  
  
• 检测器
  检测器或检测与色谱柱出口之间的PEEK管如果过长或者内径过大，检测池的体积过大以及检测器配置不恰当（响应时间设置过长）。
  
  
  对于PEEK管的内径，建议的是尺寸是0.007~0.010''，且不宜过长。
• 泄漏
  泄漏是造成HPLC常见的异常的原因，这里峰展宽的泄漏原因主要可以关注在色谱柱到检测器之间的泄漏，当然，其他部位诸如流动输液泵，密封垫圈处的泄漏也有可能会导致峰展宽。 转载于pharmaGMP
  
  

老道

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