关于细菌内毒素检查法验证的一些疑问

fellyfish

本人最近准备做新产品的内毒素检查法验证，看了看药典和2010版的《检验药品操作规范》，有如下一些问题：
1、在操作规范中提出在正式干扰实验前要进行预实验，这个预实验的目的究竟是什么？2015版药典中并没有提到预实验，这个预实验是一定要做吗？
2、《操作规范》中提到，干扰实验目的是在供试品存在的情况下内毒素与鲎试剂的反应是否正常，与所使用鲎试剂的灵敏度无关，因此可在干扰实验中原则上课使用任一灵敏度的鲎试剂。如果根据这一说法，我们新产品的限值只有0.2EU/ML，那么我采用0.25EU/ML的鲎试剂 也是可以的了？
3、如果在预实验中采用灵敏度0.25EU/ML的鲎试剂，那么在正式实验中一定也要采用相同来源的0.25EU/ML的鲎试剂吗？如果可以采用不同的，那么通过预实验摸索出来的稀释倍数，还有意义吗？
4、如果在干扰实验中采用0.25EU/ML，稀释倍数5倍的话，那么我在日常检查中可以采用0.06EU/ML，稀释倍数为5倍的做法吗？还是只能严格按照干扰实验中的条件来？


请各位大牛多多指教！

大师兄

1.预实验的目的：可以大致的判断在哪个浓度没有干扰，在正式干扰试验的时候直接用该浓度进行干扰试验，避免了盲目的去选浓度去做干扰试验，减小工作量
2.采用0.25EU/ML的鲎试剂做干扰试验行
3.进行干扰试验的目的是供试品存在的情况下内毒素与鲎试剂的反应是否正常，所有正式做样品的时候要把供试品稀释至干扰试验浓度以下的浓度去做，这样试验才有效
4.最好比5倍大，但不要超过MVD

fellyfish

更正下，我提的第3点是说在正式干扰实验中采用的鲎试剂灵敏度与来源，与预干扰实验中是不是一定要一样？
第4点，你的意思是在做供试品实验中，可以采用与干扰实验中不一样灵敏度的鲎试剂？灵敏度不同的鲎试剂，抗干扰能力会不会也有所不同？用不同灵敏度实验做出来的干扰实验结果，还有没有意义？

阿秀哥

最好选用灵敏度是0.125EU/ml的吧，这样会比较好