内毒素干扰试验不同稀释方法结论不一样，哪种更好呢？

haishuang8279

因为换了一家公司工作，发现内毒素干扰试验稀释的方法不一样，也没在意。然后在一个样品干扰实验出现问题时，送原公司代检，发现结论居然不一样。哪种稀释方法更合理呢？

方法一	干扰试验系列溶液的制备（B组）	取标准溶液（4λ）0.7ml，加入供试品（2C）0.7ml，得B1溶液（2λ）1.4ml。	全凝	方法二	干扰试验系列溶液的制备（B组）	取标准溶液（4λ）0.6ml，加入供试品（2C）0.6ml，得B1溶液（2λ）1.2ml。	全凝
		取B1溶液0.7ml，加入供试品（2C）0.7ml，得B2溶液（λ）1.4ml。	全凝			取B1溶液0.3ml，加入供试品（C）0.3ml，得B2溶液（λ）0.6ml。	全凝
		取B2溶液0.7ml，加入供试品（2C）0.7ml，得B3溶液（0.5λ）1.4ml。	全凝			取B1溶液0.2ml，加入供试品（C）0.6ml，得B3溶液（0.5λ）0.8ml。	不凝
		取B3溶液0.7ml，加入供试品（2C）0.7ml，得B4溶液（0.25λ）1.4ml。	全凝			取B1溶液0.1ml，加入供试品（C）0.7ml，得B4溶液（0.25λ）0.8ml。	不凝
	鲎试剂标示灵敏度对照系列溶液的制备（C组）	取标准溶液（2λ）1.4ml，为C1溶液（2λ）。	全凝		鲎试剂标示灵敏度对照系列溶液的制备（C组）	取标准溶液（2λ）1.2ml，为C1溶液（2λ）。	全凝
		取C1溶液0.7ml，加入BET水0.7ml，得C2溶液（λ）1.4ml。	全凝			取C1溶液0.3ml，加入BET水0.3ml，得C2溶液（λ）0.6ml。	全凝
		取C2溶液0.7ml，加入BET水0.7ml，得C3溶液（0.5λ）1.4ml。	不凝			取C1溶液0.2ml，加入BET水0.6ml，得C3溶液（0.5λ）0.8ml。	不凝
		取C3溶液0.7ml，加入BET水0.7ml，得C4溶液（0.25λ）1.4ml。	不凝			取C1溶液0.1ml，加入BET水0.7ml，得C4溶液（0.25λ）0.8ml。	不凝

样品都是不凝的，阴性也不凝。欢迎大家批评指导，谢谢先！



补充内容 (2017-11-29 11:57):
关键的关键在于两种方法结论不一样啊，十分困扰

若平

方法一的 干扰试验系列溶液的制备（B组）也没有符合鲎试剂灵敏度复核实验呀

lxiaof

方法一较好，梯度稀释采用对倍稀释易于掌握，差错率少。取样量可以更少点，混合液控制在1ml就可以了。最后结果不一致和稀释液混合是否均匀有关，可以调查下

若平

我觉得跟哪种方法稀释关系不大

mwp58403

方法一：B1浓度为2λ+c；B2浓度为λ+3/2c；B3为λ/2+7/4c；B4为λ/4+15/8c；
方法二：B1浓度为2λ+c；B2浓度为λ+c；B3为λ/2+c；B4为λ/4+c；
方法一你看一下，是否都超过最大不干扰浓度了

haishuang8279

mwp58403 发表于 2017-11-29 12:35
方法一：B1浓度为2λ+c；B2浓度为λ+3/2c；B3为λ/2+7/4c；B4为λ/4+15/8c；
方法二：B1浓度为2λ+c；B2浓 ...

你分析的很对，方法一稀释有问题。谢谢我知道问题出在哪啦！

若平

若平

方法一：B1浓度为2λ+c；B2浓度为λ+3/2c；B3为λ/2+7/4c；B4为λ/4+15/8c；
方法二：B1浓度为2λ+c；B2浓 ...


请问：浓度是怎么算出来了，刚刚接触内毒素，蒙圈中

C_c1991

方法一得到的B2、B3、B4的内毒素含量对，但是供试品浓度不对，应该用供试品浓度为2c的溶液分别和含量为4λ、2λ、λ、0.5λ的内毒素标准溶液等体积混合，得到供试品浓度为c，内毒素含量为2λ、λ、0.5λ、0.25λ的系列B溶液。

若平

C_c1991 发表于 2017-11-30 07:38
方法一得到的B2、B3、B4的内毒素含量对，但是供试品浓度不对，应该用供试品浓度为2c的溶液分别和含量为4λ ...

谢谢，可是方法一的供试品是像您说的那样配制的呀，越来越蒙圈了

若平

mwp58403 发表于 2017-11-29 12:35
方法一：B1浓度为2λ+c；B2浓度为λ+3/2c；B3为λ/2+7/4c；B4为λ/4+15/8c；
方法二：B1浓度为2λ+c；B2浓 ...

谢谢 亲亲 彻底懂了，不好意思，给您添麻烦了

若平

mwp58403 发表于 2017-11-29 12:35
方法一：B1浓度为2λ+c；B2浓度为λ+3/2c；B3为λ/2+7/4c；B4为λ/4+15/8c；
方法二：B1浓度为2λ+c；B2浓 ...

谢谢 亲亲 彻底懂了，不好意思，给您添麻烦了

欧雪梅

mwp58403 发表于 2017-11-29 12:35
方法一：B1浓度为2λ+c；B2浓度为λ+3/2c；B3为λ/2+7/4c；B4为λ/4+15/8c；
方法二：B1浓度为2λ+c；B2浓 ...

老师您好：我还有一个问题请教您
如何选择鲎试剂？（根据什么来选择鲎试剂的灵敏度？）

mwp58403

欧雪梅 发表于 2017-12-6 16:18
老师您好：我还有一个问题请教您
如何选择鲎试剂？（根据什么来选择鲎试剂的灵敏度？）

第一：根据所检测供试品的微生物限度选择，如细菌内毒素检查用水的内毒素要求为小于0.015EU/ml；
第二：c=λ/L，一般同一个品种其内毒素限度值L为定值，那么λ越大，其最小有效稀释浓度越大，浓度越大，产生干扰的可能也越大，当然你前期是应该有干扰试验的结论的。

若平

mwp58403 发表于 2017-12-7 09:04
第一：根据所检测供试品的微生物限度选择，如细菌内毒素检查用水的内毒素要求为小于0.015EU/ml；
第二： ...

谢谢老师，过一段时间我会亲自体验一下细菌内毒素的检验，如再有问题，再麻烦您，万分感谢！我们要做器械的内毒素！