利用液质联用仪测试多粘菌素E残留

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多粘菌素是由多黏类芽孢杆菌产生的一组环肽类抗菌药物，主要适用于需氧革兰阴性菌导致的各种急慢性感染,可分为多粘菌素A、B、C、D、E、K、M和P8种，其中多粘菌素E(又称粘菌素)毒性较小，在临床上应用较多。我国对在动物源食品中的多粘菌素E最高残留限量(MRL)做出了严格规定：在肌肉、脂肪、肝脏中为150μg／kg，肾脏中为200μg／kg。如何在生产过程中控制其残留？液相色谱一串联质谱(LC—MS／MS)技术由于具有灵敏度高、专属性强和便于确证等优点已被应用于动物源食品中多残留检测，利用设备并查阅相关文献资料，利用超高效液相色谱一串联质谱(UPLC—MS／MS)技术检测了肌肉、肝脏和肾脏中多粘菌素E残留含量。

精确称取3.0g样品置于离心管，肌肉、肝脏和肾脏样品中加4％三氯乙酸的溶液、4％乙酸铅溶液，涡旋混合后振荡提取10min，8000r／min离心操作后转移提取液。再向提取液中加入10mL正己烷，涡旋混合振荡10min。以8000r／min离心操作5min后弃去上层有机相。依次用5mL甲醇、5mL水、5mL2％三氯乙酸溶液活化HLB固相萃取柱，将提取液全部过柱，用5mL2％三氯乙酸溶液淋洗，用5mL90％甲醇溶液洗脱柱上吸附物。洗脱液在30℃水浴中氮气吹至近干，残留物用2.0mL0.1％甲酸溶液溶解后滤膜过滤，供液相色谱-质谱仪测定。

色谱柱	AcquityUPLCBEHC18柱
流动相	A相为含0.1％甲酸的乙腈溶液，B相为0.1％甲酸溶液；
流速	0.4mL／min
进样量	10μL。

质谱条件：离子源：电喷雾离子源，正离子模式；毛细管电压：1.5kV；源温度：120℃；去溶剂温度：350℃；锥孔气：氮气，流速50L／h；去溶剂气：氮气，流速600L／h。利用超高效液相色谱-串联质谱法处理多粘菌素E操作过程简单易行，检测结果稳定性好，适用于大量样品多粘菌素E残留的同时检测。

粘菌素E的分子离子全扫描质谱图及多粘菌素E₁多粘菌素E₂碎片离子质谱图