电泳图，DNA污染检测

youjunya

1.前五条条带是不同浓度的人类DNA条带，这结果表现得对不对。最后一条是marker，marker为什么会连一起了，这种是什么情况
2.今天下午被告知，加了染料的琼脂能加热重复使用且不会破坏染料，也就是说融完琼脂不用再添加染料，那请问为什么我们加染料要等到不烫手的温度才加呢

zq2008fish

先说第二个问题：加热程度对染料的破坏程度不一样，按照原来方法加热溶化凉一会后加染料制备凝胶就行。
第一个问题分解一下：首先，marker没跑开，从制胶、电泳及marker本身找问题。marker各条带是多大，有没有降解，凝胶的浓度是多少，此浓度的凝胶能分开DNA分子大小的范围是多少，电泳时的电压是多少。然后再看此实验人类DNA分子条带大小，5个不同浓度是指什么？总共有条带的泳道是10个，左边9个分别是什么？

歪说歪有李

这个应该在分析板块讨论

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王若竹

zq2008fish 发表于 2021-4-14 08:46
先说第二个问题：加热程度对染料的破坏程度不一样，按照原来方法加热溶化凉一会后加染料制备凝胶就行。
第 ...

marker没跑开，根据我之前的经验，应该是配凝胶的试剂有问题（查查放冰箱保存的那几个试剂，重新配一下）、另一个就是电泳液，这个一般重复用的次数不要超过3次，就不会有问题。

youjunya

zq2008fish 发表于 2021-4-14 08:46
先说第二个问题：加热程度对染料的破坏程度不一样，按照原来方法加热溶化凉一会后加染料制备凝胶就行。
第 ...

我的maker是Takara DL1000marker。条带分别是100、200、300、400、500、700、1000。放4°保存，maker什么情况会降解。胶的浓度是1％，最适合片段为500bp～10kb的DNA分离。电泳电压是90V。人类DNA片段大于50kb。我这个实验是为了验证浸提液不含人类DNA。1-5的泳道加的样分别是五个不同浓度人类DNA，第6个是阴性对照加的是水，7-9加的是我们公司产品的浸提液。

youjunya

歪把子 发表于 2021-4-14 08:16
这个应该在分析板块讨论

请问分析板块在哪呢

zq2008fish

youjunya 发表于 2021-4-15 13:15
我的maker是Takara DL1000marker。条带分别是100、200、300、400、500、700、1000。放4°保存，maker什么 ...

marker，反复冻融或经常长时间放在室温就会降解。现在看来是凝胶的问题，检查配胶试剂和电泳液，重新制备试剂再配胶