USP药典的197U，遇上一个特纠结的问题

红豆杉南国

疑问：

根据197U进行下述产品A专论项下的紫外吸收测试，是否需要将供试品与对照品溶液在200~400nm录制光谱图，并比较供试品溶液与对照品溶液是否在相对波长处有最大吸收与最小吸收，然后取271nm附近最大的吸光度进行吸光度比值计算（还是根上述200～400nm中扫描出来的结果直接用数据进行计算？）；如果对照品与供试品溶液在相同波长处有最大与最小吸收，且两者在271nm附近吸光度比值未超过3%为该产品该项符合规定；还是仅需要在271nm进行对照品与供试品溶液的吸光度测试，其吸光度比值未超过3%为该产品该项测试符合规定。


各论中产品A紫外项下描述

Identification—

B: Ultraviolet Absorption 197U

Solution: 25 µgper mL.

Medium:methanol.

Absorptivities at 271 nm, calculated on thedried basis, do not differ by more than 3%.

各论中产品B的紫外项下描述

IDENTIFICATION

• B. Ultraviolet Absorption  197U  

Samplesolution: 80 µg/mL in 0.1 N hydrochloric acid

Acceptancecriteria: Meets the requirements

附USP药典197U原文及翻译稿（翻译稿不能显示出来，见附件）

ULTRAVIOLET ABSORPTION

The reference  197U in a monograph signifies that a test solution and a Standard solution areexamined spectrophotometrically, in 1-cm cells, over the spectral range from200 to 400 nm unless otherwise specified in the individual monograph.

Dissolve a portion of the substance underexamination in the designated Medium to obtain a test solution havingthe concentration specified in the monograph for Solution. Similarlyprepare a Standard solution containing the corresponding USP ReferenceStandard.

Record and compare the spectra concomitantlyobtained for the test solution and the Standard solution. Calculateabsorptivities and/or absorbance ratios where these criteria are included in anindividual monograph. Unless otherwise specified, absorbances indicated forthese calculations are those measured at the maximum absorbance at about thewavelength specified in the individual monograph. Where the absorbance is to bemeasured at about the specified wavelength other than that of maximumabsorbance, the abbreviations (min) and (sh) are used to indicate a minimum andshoulder, respectively, in an absorption spectrum. The requirements are met ifthe UV absorption spectra of the test solution and the Standard solutionexhibit maxima and minima at the same wavelengths and absorptivities and/orabsorbance ratios are within specified limits.

翻译的部分。

紫外吸收

除另有规定外，药品标准中的<197U>系指采用分光光度法，用lcm吸收池，在200～400nm波长范围内绘制供试品溶液和对照品溶液的吸收光谱

取供试品一份，加规定的介质使溶解制成标准项下规定浓度的供试品溶液。取相应的USP标准物质同法配制对照品溶液。

记录并比较供试品溶液和对照品溶液的图谱。按照药品标准项下的规定，计算吸收系数和/或吸光度比值。除另有规定外，计算中用到的吸光度值系指药品标准中规定的最大吸收波长附近的测定值。当在药品标准中规定的波长附近测定吸光度值，而不是最大吸收波长处的吸光度值时，分别用缩写min和sh表示吸收图谱中的最小吸收和肩蜂。如果供试品溶液和对照品溶液在相同波长处有最大和最小吸收、吸收系数和/或吸光度比值符合限度要求时，供试品符合规定。

红豆杉南国

匿名者 发表于 2015-1-30 14:26
翻译的部分。

紫外吸收除另有规定外，药品标准中的系指采用分光光度法，用lcm吸收池，在200～400nm波长范 ...

谢谢……，谢谢

红豆杉南国

关注度不够啊，自己再顶一下

hongwei2000

不外就是比较最大吸收之后再加上吸收系数

红豆杉南国

hongwei2000 发表于 2015-2-1 09:23
不外就是比较最大吸收之后再加上吸收系数

那是两者都做，还是？另外是扫描的计算呢，还是271nm测定计算？

hongwei2000

红豆杉南国 发表于 2015-2-2 12:30
那是两者都做，还是？另外是扫描的计算呢，还是271nm测定计算？

直接取值计算就OK了

bijggm

先扫描样品和标准品的光谱图，比较最大吸收和最小吸收。如果最大吸收刚好就是271nm，那直接取值计算就行了，如果不是，则在271nm波长下测定吸光值再计算。

红豆杉南国

hongwei2000 发表于 2015-2-2 19:38
直接取值计算就OK了

我用了岛津UV2450，如果用光谱扫描的方式，取其值进行计算，重复测试，其自身的误差已超过3%，如果这样，误差会很大。

红豆杉南国

bijggm 发表于 2015-2-3 23:33
先扫描样品和标准品的光谱图，比较最大吸收和最小吸收。如果最大吸收刚好就是271nm，那直接取值计算就行了， ...

那如果有的批是在271，有的是272nm ,是不是需要分两个波长检测？

hongwei2000

红豆杉南国 发表于 2015-2-5 16:50
我用了岛津UV2450，如果用光谱扫描的方式，取其值进行计算，重复测试，其自身的误差已超过3%，如果这样， ...

那你仪器可以扔了
这么大的误差你OQ是怎么通过的

红豆杉南国

hongwei2000 发表于 2015-2-5 18:47
那你仪器可以扔了
这么大的误差你OQ是怎么通过的

对紫外仪器来说，定性扫描的误差比单点固定波长的误差要大的。你们的误差会大致多少？（注：我说的3%是指对照品与供试品测试结的测试结果比值。类似于外标法的计算）

hongwei2000

红豆杉南国 发表于 2015-2-6 09:07
对紫外仪器来说，定性扫描的误差比单点固定波长的误差要大的。你们的误差会大致多少？（注：我说的3%是指 ...

两位溶液有20%的差异都是正常的呀
要折算浓度的呀
也就是比较吸收系数

红豆杉南国

hongwei2000 发表于 2015-2-6 11:19
两位溶液有20%的差异都是正常的呀
要折算浓度的呀
也就是比较吸收系数

1、差不多吧，需要折算浓度及干失，对照品的含量也要折算，不过不是比较吸收系数；是按吸光度的比值来计算。
2、假如吸光度为0.500.如果对照品与样品的浓度一模一样来看，那么也就是说其吸光度的绝对误差不能相差0.015。如果不是在固定单点的波长处去测试，而是采用光谱扫描的方式的话，这个仪器的误差算大吗？

hongwei2000

红豆杉南国 发表于 2015-2-6 12:54
1、差不多吧，需要折算浓度及干失，对照品的含量也要折算，不过不是比较吸收系数；是按吸光度的比值来计算 ...

怎么可能直接比较吸光度值呢
你称量范围一般可以正负10%
你比较吸光度有什么意义

红豆杉南国

hongwei2000 发表于 2015-2-6 13:06
怎么可能直接比较吸光度值呢
你称量范围一般可以正负10%
你比较吸光度有什么意义

1、这个我也是在USP当中才看到这种测试，其原文是“如果供试品溶液和对照品溶液在相同波长处有最大和最小吸收、吸收系数和/或吸光度比值符合限度要求时，供试品符合规定”根据各论中的要求，其吸光度的比值应该不大于3%。这个相当于是鉴别项。（注：原文参照贴子）；我们推导的计算公式如下：
X=【1- （At/ mt）/ （As/ ms）】*100%       
式中： X—吸光度的比值（绝对值）；
       As—对照溶液的吸光度；
       At—测试溶液的吸光度；
        ms—对照品的称量值，mg；
        mt—供试品的称量值（按干燥品计），mg。
2、称量范围可以正负10，不过这个问题不大，因为计算中都会将相应的值折进去。

walon

红豆杉南国 发表于 2015-2-7 13:10
1、这个我也是在USP当中才看到这种测试，其原文是“如果供试品溶液和对照品溶液在相同波长处有最大和最小 ...

您好，若给的浓度过大，在规定波长下，吸光度过载，怎么选取At呢？

红豆杉南国

walon 发表于 2018-10-11 12:23
您好，若给的浓度过大，在规定波长下，吸光度过载，怎么选取At呢？

首先的前提是浓度不能过载，过载后吸光度值测出来就不准确了

walon

嗯，后来查到了药典标准，解决了。
谢谢

herozxq

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