《中国药典》2015年版 蜂蜜 5羟甲基糠醛含量

你幸福我快乐

<中国药典>2015年版 蜂蜜求教

一、5-羟甲基糠醛、鸟苷 检测波长也不一样，样品用哪个 波长检测？

二、干嘛用鸟苷计算5-羟甲基糠醛含量？

三、5-羟甲基糠醛怎么定位？

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附：药典原文：

5-羟甲基糠醛  照高效液相色谱法（通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%甲酸溶液（5：95）为流动相；5-羟甲基糠醛检测波长为284nm，鸟苷检测波长为254nm。理论板数按鸟苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备  取鸟苷对照品适量，精密称定，加10%甲醇制成每1ml含鸟苷0.2mg的溶液，即得。另取5-羟甲基糠醛对照品适量，加10%甲醇制成每1ml含4μg的溶液，作为定位用。

供试品溶液的制备  取本品1g，置烧杯中，精密称定，加10%甲醇适量溶解，并分次转移至50ml量瓶中，精密加入鸟苷对照品溶液1ml，加10%甲醇至刻度，摇匀，即得。

测定法  精密吸取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定；另取鸟苷对照品溶液，5-羟甲基糠醛对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，用以确定供试品色谱中5-羟甲基糠醛及鸟苷的色谱峰；以鸟苷对照品计算含量并乘以校正因子0.340进行校正，即得。

本品含5-羟甲基糠醛，不得过0.004%。

你幸福我快乐

《中国药典》2015年版，蜂蜜 5-羟甲基糠醛 测定  计算公式

可亲可爱

5-羟甲基糠醛难倒是用内标法来做的吗？但是从文字上看好象不是的。

yangseine

一、我是这么理解的：
1、药典所列的方法就是一个外标法，按照方法进行实验，计算鸟苷对照品含量。
2、鸟苷对照品含量乘以校正因子0.34得出理论鸟苷标准品浓度为0.2mg/ml时，5-羟甲基糠醛的含量（A）。
3、鸟苷对照品实际质量（B）。
4、得出5-羟甲基糠醛的实际含量=0.2×A/B。
二、为什么不用5-羟甲基糠醛直接计算含量：
因为5-羟甲基糠醛的含量低，考虑到仪器检测灵敏度可能达不到，所以用鸟苷检测（鸟苷的含量是5-羟甲基糠醛的3倍-字面理解0.34）。
三、5-羟甲基糠醛怎么定位：
因为对于蜂蜜来说，这两种都是杂质，含量很少，峰面积相对很小，用5-羟甲基糠醛和鸟苷的保留时间加以识别？

以上是我个人理解，也请专业人士进一步指点，学习ing。

hongwei2000

很神奇的方法
明明有5－HMF对照品
为什么还用校正因子计算
5－HMF好像也不是很贵呀
还用双波长
不知道开发的单位是怎么想的

hongwei2000

双个波长同时使用
各用各的波长去计算

你幸福我快乐

那就是 两个波长下：各自进对照+样品

284nm：进5-羟甲基糠醛对照+样品

254nm：进鸟苷对照+样品，然后计算？

那么：要5-羟甲基糠醛对照 有啥用？

风雪夜归人

刚拿到药典的时候，我也发现了这个问题，美其名曰奇葩方法！采用双波长做；5-羟甲基糠醛既做定位也做对照，但对照公式是以鸟苷内标，再剩系数计算，目前还未实际去操作，无从定论！

你幸福我快乐

谁是此方法的 发明人？出来解释一下

芦荟

被这个问题，困惑好久了，手头的蜂蜜一直没有做，会的求分享下

salihamijiqi

不要把药检所的水平想得太低，也不要把药典委员的水平想得太低，谁都知道直接外标一点法去做最容易，这个标准这么定肯定有这么定的道理，想了解更深入的建议咨询药典委这个品种的标准提高是哪个所做的，然后直接咨询起草所。另外，这个标准是14年5月16日在药典委官网公示的，公示期三个月，如果觉得这个方法做不了就要在规定的公示期内向药典委反映啊，都这个时候了，就算有问题需要改的话也不是那么容易了。

123瑾

我们也要测蜂蜜，我看了也是好复杂，都看不懂

474268272

给了校正因子应该是内标法，用鸟苷的对照品来计算吧！5-羟甲基糠醛是用来定位的，为什么用两个波长呐，那位知道？

香山红叶0357

这个项目能委托吗。这要向药检所请教了。

灵光

yangseine 发表于 2015-12-30 15:12
一、我是这么理解的：
1、药典所列的方法就是一个外标法，按照方法进行实验，计算鸟苷对照品含量。
2、鸟 ...

我们做了一批，发现供试品鸟苷峰面积比糠醛峰面积大了将近20倍，关键是供试品加了1ml鸟苷对照品，计算要不要去除供试品加鸟苷对照品的峰面积，如果不去除，我觉得供试品鸟苷峰面积和鸟苷对照品峰面积怎么计算都是超标的！供试品的鸟苷基本可以忽略，但是加了鸟苷对照品1ml之后，峰面积是鸟苷对照品的50分之一，那么计算的时候如果有这么大峰面积的话，肯定已经超标啦！

ambitionhero

期待有人回答

wwhcom

灵光 发表于 2016-4-30 10:11
我们做了一批，发现供试品鸟苷峰面积比糠醛峰面积大了将近20倍，关键是供试品加了1ml鸟苷对照品，计算要 ...

你那么计算是错的，看药典强调对照品溶液用以确定糠醛和鸟苷峰的，所以，对照品溶液里的峰面积不参与计算的，再看看药典都给了什么条件：糠醛定位，鸟苷定位，，校正因子，猜也能想到最后计算时候肯定用到这两个峰，所以计算肯定是用供试品溶液中糠醛峰面积与对照鸟苷峰面积乘校正因子加以计算的，加校正因子的主成分自身对照法，样品中加内标物质是为了消除误差，5-羟甲基糠醛属于杂质检测，属于内标法检测，进对照品的目的是为了定位。
具体公式很简单：5-HMF浓度=5-HMF峰面积/取样量*（样品中的鸟苷对照品峰面积/鸟苷对照品浓度0.2*10-3）*0.34 *100%＝”

小李子刀

首先，药典是内标法。先解释一下单独进五羟基糠醛做定位，因为你供试品出来可能有好几个峰，所以五羟基糠醛标准品的Tr定性。
其次，鸟苷对照品跟供试品里的鸟苷的色谱峰A跟相应的浓度m可以计算出校正因子f,然方法已给出校正因子（没做过不知道得出的校正因子是不是能对的上）。供试品中鸟苷的m,A，五羟基糠醛的A.前面的f,so得到了五羟基糠醛的含量。
还有两个波长的问题，（五羟基糠醛跟鸟苷它们两对某一个波长下的吸光度都不是很好，或者一个好一个不明显之类的，原谅我的不专业），其实选择一个波长，只要两种物质都有响应，能够积分就可以啦。或者方法直接设置双波长。处理的时候看那个波长下吸光度好就可以啦
如果大家觉得有什么不合理之处请批评指正。

佛手罗汉

这个说服力高一点

勤劳小蜜蜂

123瑾 发表于 2016-1-3 10:35
我们也要测蜂蜜，我看了也是好复杂，都看不懂

我们是做这的