细胞培养支原体污染预防-实验室环境空间消毒方案

szyuejun

细胞培养支原体污染了怎么办？细胞被支原体污染会有什么影响，细胞生产缓慢，细胞不贴壁悬浮起来是支原体污染了吗？细胞支原体污染预防措施有哪些管用的方法。细胞培养中常遇见的有细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染等，说起支原体污染，估计细胞培养的同学就开始犯愁了。细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%。

支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染（一些支原体在人体是正常菌群）、培养的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养和器材要保证无菌；在细胞培养中加入适量的抗生素。

据了解，抗生素不能完全根治支原体感染，停药后一段时间可以复发。因此，本文着重讲述细胞支原体污染预防之环境空间消毒方案，从根本入手预防解决细胞培养支原体污染问题，同时也能预防环境中的细菌污染、真菌污染及病毒污染等。环境空间消毒包括：环境空气消毒、物体表面消毒、生物安全柜或超净工作台灭菌及培养箱消毒。

目前大多数细胞培养室只是简单安装了臭氧消毒机，而从建立使用到后期从来没有经过大消毒（熏蒸灭菌），这给细胞培养环境微生物污染带来了极大的隐患和风险，因为臭氧消毒能力有限不稳定而且不能全面覆盖，无法杀灭微生物休眠体，单纯的臭氧消毒已不能深入彻底的解决环境微生物问题，只能说是一种微生物水平控制的辅助手段。根据美国FDA、新版GMP及相关国际组织，现行的主流无菌室环境空间消毒是过氧化氢气体灭菌，环保无毒无残留，安全又快速。过氧化氢气体灭菌应用于细胞培养室消毒代替甲醛熏蒸将成为未来趋势。

过氧化氢干雾气体能快速杀灭细菌、真菌、支原体及病毒，恰好，法国欧菲姆过氧化氢干雾灭菌新技术应用于细胞培养室环境消毒则更具创新性和实用适用价值。

环境及人员操作污染风险大，干雾灭菌方法能把这种污染风险降至最低，其灵活消毒的特点更能为微生物防控提供有力支撑，细胞房环境、培养箱等均可轻松进行灭菌处理而无需再投入过多的人力和物力，平常消毒及应急消毒可谓独一无二。

法国欧菲姆过氧化氢干雾灭菌器源于欧盟GMP设计，自身符合洁净区净化要求，不带入任何外源污染的同时高效根除洁净室空间微生物，达到无菌净化的目标。采用了全球最先进的雾化技术，雾化颗粒小于3微米，增效了空间扩散均匀性，迅速弥漫充满整个密闭空间不放过每一处死角，灭菌效果堪称空前绝后，其均匀性、无残留及对机器无伤害特征非常吻合细胞房环境消毒及培养箱里面消毒。

欧菲姆干雾过氧化氢灭菌器源于欧洲法国，专门针对洁净厂房无菌室GMP设计，适应大空间灭菌，小空间灭菌更灵活。采用了全球最先进雾化技术，雾化粒径平均达到3—5微米，配合空间杀孢子剂使用，灭菌效果能对嗜热脂肪杆菌芽孢降低6个对数值。

原理是：欧菲姆采用独到而特殊的结构设计，使得在仅仅输入电能的情况下，集压缩、ventur喷射和雾滴内外部溅射碎化功能于一体，使专用液态杀孢子剂变成气雾状态极微小颗粒喷出，高速极小微粒与空气接触后充分气化，变成气态过氧化氢即为“干雾”。

欧菲姆过氧化氢灭菌优势体现：

1、杀菌效果好，对嗜热脂肪杆菌芽孢10分钟有6个对数值的杀灭率；

2、广谱的杀菌能力，能杀灭包括病原菌（支原体、衣原体、立克次氏体）、芽孢、真菌及病毒在内的200多种微生物，灭菌原理特殊无耐受性产生；

3、平均5um干雾颗粒，扩散性非常优良，能扩散到每一个卫生死角落，在空气中做不规则布朗运动；

4、干雾气体性能稳定，不受环境湿度、温度、PH的影响，活性稳定攻击微生物活体；

5、无色无毒，无残留，安全可靠，完全分解为氧气和水；

6、验证资料齐全，提供验证模板，容易通过GMP灭菌验证；

7、杀菌时间超短，2-3个小时可完成整个灭菌流程，高效节能；

8、设备体积小，操作方便，灵活移动满足不同空间需求，适应大空间灭菌；

9、性价比高，节约消毒成本。

过氧化氢灭菌系统参数：

喷雾粒径：平均3μm（粒子径为镭射折射法的测定值）

动能：电源

喷雾速度：80m/s

喷雾量：1000ml/60min

配合杀孢子剂容量：1000ml

功率：1.1千瓦

适用液体：诺福高纯度稳定过氧化氢杀孢子剂（干雾为过氧化氢）

灭菌体积：50-500立方米

材质：HDPE

尺寸：50cmx33cmx34cm(长×宽×高)