酵母扩培工艺规程

毒手药王邓智先

酵母扩培工艺规程 
1  酵母培养流程 
麦汁杀菌→5ml小试管→10ml大试管→20ml大试管→500ml小三角瓶→2000ml大三角瓶→25L卡氏罐→600L一级扩培罐→6000L二级扩培罐→120t生产用大罐 2  清洗杀菌 
2.1  实验室麦汁杀菌 2.1.1  取糖化头道麦汁。 
2.1.2  过滤、加蛋清煮沸、后调PH值5.4-5.7，制成麦汁（液体培养基），分装成4支5ml试管、4只10ml大试管、4只20ml大试管、3只500ml小三角瓶（内装麦汁200ml）、2只2000ml大三角瓶，放入杀菌锅内，121℃杀菌15-20分钟，冷却备用。20L卡氏罐内麦汁取糖化加酒花定型麦汁，放入杀菌锅内，121℃杀菌20-30分钟。 2.2  现场培养设备清洗 
2.2.1  用80-85℃热水分别清洗一级扩培罐、二级扩培罐、物料管20分钟。 2.2.2  用80℃碱水分别清洗一级扩培罐、二级扩培罐、物料管20分钟。 2.2.3  用80-85℃热水分别清洗一级扩培罐、二级扩培罐、物料管20分钟。 2.3  现场管道容器杀菌 
2.3.1  一级扩培罐、二级扩培罐进麦汁前通蒸汽杀菌，0.1MPa杀菌30分钟。 2.3.2  每次接种前，一级扩培罐、二级扩培罐、物料管通蒸汽杀菌15-20分钟。 2.4  现场麦汁杀菌 
一级扩培罐、二级扩培罐进麦汁后，0.1MPa杀菌30分钟。 3  培养工艺控制要点  
3.1  将斜面菌种在无菌室中取1菌耳接入4支5ml液体小试管，25℃培养24小时。 3.2  在无菌室中取5菌耳接入4支5ml液体小试管，25℃培养24小时。 
3.3  在无菌室中将4只5ml小试管分别接入4只10ml液体大试管，25℃培养24小时。 
3.4  在无菌室中将4只10ml液体大试管分别接入4只20ml液体大试管，25℃培养24小时。 3.5  在无菌室中将4只（选3只）20ml液体大试管分别接入3只500L（200ml麦汁）小三角瓶中，23℃培养24小时。 
3.6  在无菌室中将3只（选2只）500L小三角瓶接入2只2000ml大三角瓶，22℃培养24-36小时（酵母数达到3000-4000万个/ml转接下一级）。 
3.7  在无菌室中将入2只2000ml大三角瓶接入20L卡氏罐，18℃培养24-36小时（酵母数达到3000-4000万个/ml转接下一级）。 
3.8  在酵母扩培室中将20L卡氏罐接入一级扩培罐（冷麦汁300L），立即充氧5min,然后每1小时充氧1分钟，15-16℃培养24-36小时（酵母数达到3000-4000万个/ml转接下一级）。 
3.9  在一级扩培罐中，继续追加冷麦汁300L，立即充氧5min，然后每1小时充氧1分钟，15-16℃培养24小时（酵母数达到3000-4000万个/ml转接下一级）。 3.10 将一级扩培罐接入二级扩培罐（6.0m3冷麦汁），立即充氧5-8min，然后每1小时充氧1分钟，13-14℃培养36-48小时（酵母数达到3000-4000万个/ml转接下一级）。 3.11 将二级扩培罐接入生产用大罐（120t），先接入第一锅冷麦汁约42KL，麦汁冷却温度10℃±0.2，全程充氧，24-36小时后测酵母数。 
3.12 当酵母数达到3000-4000万个/ml，再连续追加二锅冷麦汁，麦汁冷却温度9℃±0.2，全程充氧，满罐后再按正常的大罐发酵工艺进行。

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