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生物安全柜、阳性菌复苏传代

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发表于 2022-9-28 10:34:09 | 显示全部楼层 |阅读模式

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蒲友们,大家好!!!在下是医疗器械的一枚小白,有以下问题想要请教大家。谢谢~~~~
1、实验:在生物安全柜内进行阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉、白色念珠菌)复苏、传代操作
2、背景:生物安全柜内不能使用酒精灯
3、问题①:在用接种环进行复苏、传代操作时,接种前可以用灭菌好的接种环(或一次性接种环)进行操作,接种后接种环蘸有阳性菌,此时如何灭菌或消毒?
     问题②:将接种后蘸有阳性菌的接种环投入配制好的84消毒液或者新洁尔灭进行消毒,消毒效果是否可行?
     问题③:将84消毒液或者新洁尔灭(包括接种环等废弃物)放入灭菌锅内一起灭菌。是否可行?
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药生
发表于 2022-9-28 10:38:50 | 显示全部楼层
你的这些阳性菌我们都有,我好奇的是为啥不能使用酒精灯?
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药徒
发表于 2022-9-28 10:51:46 | 显示全部楼层
接种环可以用红外消毒     一次性的接种环和废弃物用袋子装好直接灭菌就可以了
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药徒
发表于 2022-9-28 10:51:51 | 显示全部楼层
好像是说酒精灯火焰影响了里面的气流啥来的
不用酒精灯的话,可以使用一个叫接种环灭菌器的玩意
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药生
发表于 2022-9-28 11:16:02 | 显示全部楼层
大侠虾 发表于 2022-9-28 10:51
好像是说酒精灯火焰影响了里面的气流啥来的
不用酒精灯的话,可以使用一个叫接种环灭菌器的玩意

那就申请购买呗 能实现么
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药士
发表于 2022-9-28 11:27:35 | 显示全部楼层
静待花开1234510 发表于 2022-9-28 10:38
你的这些阳性菌我们都有,我好奇的是为啥不能使用酒精灯?

没有法规规定不能使用酒精灯,仅仅是从安全角度,因为酒精灯会有热的乙醇蒸发,会对高效过滤器产生影响,甚至发生安全事故。
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药生
发表于 2022-9-28 11:28:48 | 显示全部楼层
峰行 发表于 2022-9-28 11:27
没有法规规定不能使用酒精灯,仅仅是从安全角度,因为酒精灯会有热的乙醇蒸发,会对高效过滤器产生影响, ...

那老师建议怎么操作更加安全合规呢
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药士
发表于 2022-9-28 11:33:27 | 显示全部楼层
只需要回答你的问题1就可以了,可以使用接种环灭菌器(红外灭菌器),大概几百元,也可以使用一次性无菌接种环,接种完毕过度灭菌灭活丢弃即可。也可以多备几个铂丝接种环,每操作一种菌接种环随物品清场出去,再取一个新的接种环。无论采用哪种,只要能达到避免交叉污染的目的就可以。
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药生
发表于 2022-9-28 14:07:45 | 显示全部楼层
方法总比困难多
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药徒
发表于 2022-9-28 17:04:47 | 显示全部楼层
问题①:在用接种环进行复苏、传代操作时,接种前可以用灭菌好的接种环(或一次性接种环)进行操作,接种后接种环蘸有阳性菌,此时如何灭菌或消毒?
答:使用一次性接种环
问题②:将接种后蘸有阳性菌的接种环投入配制好的84消毒液或者新洁尔灭进行消毒,消毒效果是否可行?
答:接种后直接丢到垃圾袋中
问题③:将84消毒液或者新洁尔灭(包括接种环等废弃物)放入灭菌锅内一起灭菌。是否可行?
答:灭废弃物即可,另外做好安全柜内壁清洁消毒
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药生
发表于 2022-9-29 08:34:44 | 显示全部楼层
安全柜内不能使用酒精灯?你怕烧起来了啊,酒精灯的火焰根本就达不到在逆风高效下能将高效点着的地步,这种事故的发生概率我还没有听说过,如果是生物安全柜没有打开就操作倒是有可能。
一次性接种环使用过后用灭菌柜灭菌就好了;
用84消毒可行;
使用完的废弃物要确认是否是空瓶,没有任何东西,要放入包装才能放入灭菌锅内进行灭菌。
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 楼主| 发表于 2022-9-29 09:40:50 | 显示全部楼层
非常感谢大家的指导~~~~~
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药士
发表于 2022-9-30 08:47:47 | 显示全部楼层
cloudsky 发表于 2022-9-29 08:34
安全柜内不能使用酒精灯?你怕烧起来了啊,酒精灯的火焰根本就达不到在逆风高效下能将高效点着的地步,这种 ...

防患于未然,现在酒精灯在药企已基本废弃(除非革兰氏染色),都是出于安全考虑,消防也对实验室有要求不得出现明火。
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药徒
发表于 2022-9-30 16:21:44 | 显示全部楼层
不一定要用酒精灯,有一种专门的打火器,类似防风打火机。
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