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发表于 2024-7-17 17:20:14
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1、首先了解基本信息(分子量,结构(官能团),溶解性(水,甲醇,ACN,DMSO,正己烷等),酸性化合物还是碱性化合物,盐酸盐等)如果网上查不到就通过NMR,IR,紫外,旋光度等去了解这些性质,对目标物的极性有个初步的了解,基本判断是否有紫外吸收,再C18是否有保留
2、目的(中控,设备清洗,原料,含量还是有关物质),根据不同目的开发不同方法,比如中控只是监控原料残留,一般只需要目标物和主成分与相邻峰分离达到要求即可等
3、色谱柱初步筛选和极性的判断,自然界的化合物90%可以通过UV法+MS+蒸发光散射检测器(ELSD)检测出,然而UV法能测其中的60-70%左右,因此基于基本有限选择HPLC
4、根据 初步赛选结果,对方法的峰型,分离效果等取优化(比如酸性化合物 可用酸性流动性等) ,要求分离,基线平稳,空白无干扰,根据实际情况取调整
5、对于有关物质 方法优化后,再沐目标物的降解(酸碱氧化光等)进行必要的破坏,再检测,确认方法是否可行
6、后续优化,再工艺监控过程中,再次优化。
方法开发运气和经验占很大比例,慢慢摸索学习吧,没有固定方法和流程。 |
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