黑曲霉菌液制备

（、

请问如何制备黑曲霉菌液，能2-8℃保存7天的？

156067

新鲜培养物？？？明晃晃的几个大字

（、

156067 发表于 2024-9-9 16:27
新鲜培养物？？？明晃晃的几个大字

药典制备的菌液只能当天用。

机智鼠

黑曲霉菌液的制备方法，首先取冻干菌或斜面培养物接种至适宜的琼脂培养基表面，然后经过菌株复苏、复壮等步骤后，待孢子成熟以无菌生理盐水洗脱，纱布或脱脂棉过滤，得到孢子悬液。这种制备好的黑曲霉菌液可以在2-8℃的条件下保存7天。在制备过程中需注意操作规范，避免污染。
参考条款：

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

156067

（、 发表于 2024-9-9 16:32
药典制备的菌液只能当天用。

是当天用，你要保存七天做什么？用菌的时候就做好计划，按每种菌不同的培养周期安排好，提前传代培养，做实验当天就能用了。

Jpz77n2yf

甘油管挺香的

（、

156067 发表于 2024-9-9 16:37
是当天用，你要保存七天做什么？用菌的时候就做好计划，按每种菌不同的培养周期安排好，提前传代培养，做 ...

你这样的话，我斜面要做挺多的

（、

Jpz77n2yf 发表于 2024-9-9 16:41
甘油管挺香的

来来来，传授点资料学习下

（、

机智鼠 发表于 2024-9-9 16:35
黑曲霉菌液的制备方法，首先取冻干菌或斜面培养物接种至适宜的琼脂培养基表面，然后经过菌株复苏、复壮等步 ...

机智鼠这个用法可以吗？？

Jpz77n2yf

（、 发表于 2024-9-9 16:44
来来来，传授点资料学习下

可由冻干菌种或瓷珠接种的斜面经培养后，将无菌接种环轻轻刮取斜面上菌苔，并通过接种环与试管壁之间轻轻摩擦使细菌充分扩散到预先装于试管中的无菌生理盐水中；黑曲霉用含0.05%聚山梨酯80的生理盐水洗脱孢子。根据试验需要制备成适宜浓度的菌悬液，然后加入含无菌甘油的生理盐水制成含20%甘油的甘油冷冻管，混匀，分装无菌冻存管空管中，制备好的甘油冷冻管在-30℃以下贮存；使用时可直接取出1支小管使用，同时用平皿计数。
仅限参考，根据各自实验室的需求来

156067

（、 发表于 2024-9-9 16:43
你这样的话，我斜面要做挺多的

又不在同一天开始做斜面，不多了，菌才几种
甘油管、磁珠这些是保存菌种用的，又不是保存菌液，菌液保存七天你还得去验证，然后被挑战为啥和药典不一样。

（、

156067 发表于 2024-9-9 16:56
又不在同一天开始做斜面，不多了，菌才几种
甘油管、磁珠这些是保存菌种用的，又不是保存菌液，菌液保存 ...

加个v详细交流一下可以吗

（、

Jpz77n2yf 发表于 2024-9-9 16:53
可由冻干菌种或瓷珠接种的斜面经培养后，将无菌接种环轻轻刮取斜面上菌苔，并通过接种环与试管壁之间轻轻 ...

你们把最重要的菌液浓度确认私藏了

（、

156067 发表于 2024-9-9 16:56
又不在同一天开始做斜面，不多了，菌才几种
甘油管、磁珠这些是保存菌种用的，又不是保存菌液，菌液保存 ...

不对啊，你这样制备的菌液不知道浓度噢

Jpz77n2yf

（、 发表于 2024-9-9 17:19
不对啊，你这样制备的菌液不知道浓度噢

根据需要制备适宜的浓度，所以在制备成甘油管前会用紫外分光光度计测试其大致浓度

好吧那就这样吧

学习学习。  

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156067

（、 发表于 2024-9-9 17:19
不对啊，你这样制备的菌液不知道浓度噢

麦氏浊度测大概，然后稀释，取各稀释梯度的菌液平板涂布确认菌落数，验证稀释倍数。

或者麦氏浊度测大概，然后稀释，最有可能是适用的那几个梯度都拿来做实验用，结果取符合要求的那个梯度。

稀释次数每个实验室、每个人、甚至每一次都不一定相同。

（、

156067 发表于 2024-9-10 07:57
麦氏浊度测大概，然后稀释，取各稀释梯度的菌液平板涂布确认菌落数，验证稀释倍数。

或者麦氏浊度测大 ...

那你这样做的菌液就不是当天做当天用，有效期就不是24小时咯

（、

Jpz77n2yf 发表于 2024-9-9 17:36
根据需要制备适宜的浓度，所以在制备成甘油管前会用紫外分光光度计测试其大致浓度

紫外分光光度计，很高级啊，这样测试的浓度准度高吗

156067

（、 发表于 2024-9-10 09:12
那你这样做的菌液就不是当天做当天用，有效期就不是24小时咯

你要有效期就做个存放验证。你要当天用，验证稀释倍数和实验分开。又不是应试教育只有唯一答案。