培养基配制

龙雨田

琼脂培养基，需要加热融化，调节PH这一步如何进行，直接用PH计？

机智鼠

在制备琼脂培养基时，确实需要对培养基进行加热以使其融化，并在冷却前调节pH值至适合微生物生长的范围。关于如何调节pH值，以下是专业步骤：

1. 准备阶段：确保所有原料和设备都已准备好，包括pH计（已校准）、精密天平、磁力搅拌器等。

2. 加热融化：将琼脂和其他成分按照配方比例加入蒸馏水中，使用加热装置（如电磁炉或水浴）加热至琼脂完全融化。

3. pH调节：在培养基温度降至约50°C左右时开始调节pH值。这是因为高温可能影响pH计的准确性，并且某些缓冲液在高温下的表现也可能不同。使用精密的pH计测量溶液的pH值，并根据需要添加适量的酸（如HCl）或碱（如NaOH）来调整pH值。通常，微生物培养基的理想pH范围是6.8到7.2，具体取决于培养的微生物种类。

4. 混合均匀：在调节pH值后，继续搅拌以确保溶液混合均匀。

5. 灌装与固化：将调节好pH值的培养基倒入平板或试管中，让其自然冷却并固化。

请注意，整个过程中应遵循无菌操作原则，以避免污染。此外，对于特定的微生物培养，可能需要根据具体的实验要求调整pH值的目标范围。

参考法规或指南条款：
- 中国药典（ChP）相关章节，特别是关于培养基制备的部分。
- ISO 11133系列标准，关于无菌医疗器械的生物相容性测试方法。
- 美国材料与试验协会（ASTM）相关标准，如ASTM D1236用于土壤和水的pH值测定。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

深夜哭的舔狗

鼠鼠说的没毛病啊

龙雨田

机智鼠 发表于 2025-2-7 09:16
在制备琼脂培养基时，确实需要对培养基进行加热以使其融化，并在冷却前调节pH值至适合微生物生长的范围。关 ...

每种培养基有固定的PH值，是否要调到这个值，50℃对PH值的影响还是有的，这个是否准确，调完PH后，还要灭菌

海上森林一只猫

学习一下

田园小草

龙雨田 发表于 2025-2-7 09:39
每种培养基有固定的PH值，是否要调到这个值，50℃对PH值的影响还是有的，这个是否准确，调完PH后，还要灭 ...

灭菌前调节ph完全凭经验，反正灭菌后还要测ph，那才是关键

吉首黔哥

未加琼脂之前进行调节所需pH，调节完后分装10-20mL出来测消后，剩余的部分加琼脂、加热，然后分装

来自苹果APP客户端

咒逐

这年头自配培养基还是很罕见啊，北京三药的美坛培养基和中检院关系众所周知，一般都选这个，但考虑成本选用别家也不是不行，适用性为王道。

商品粉末培养基，通常而言不需要调pH，灭出来测不符合多是因为水分流失过多或者加热过程粘锅等出问题了。

如果是自配，通常是先配液、再调pH，升温之后加琼脂，琼脂一般不影响pH，然后溶解、分装、灭菌、复测pH。但是，琼脂如果不纯，可能会有影响，新批号或者新厂家的最好做一批1L左右试试。

物生物

琼脂培养基的pH调节步骤：琼脂培养基在使用前需要经过加热融化，加热融化琼脂培养基，琼脂培养基在溶解时，温度应在45°C以上，因此需要将其加热至完全融化，使用pH计进行pH调节，调节pH时，首先需要用已知pH的标准缓冲液溶液对pH计进行校准。然后将复合电极和电阻温度计（如果有）置于培养基中，从烧杯远离电极的一端缓慢加入适量的盐酸和氢氧化钠，直到培养基达到并保持所需的pH值
在调节pH时，需要注意以下几点：温度补偿：pH计的温度补偿应考虑到温度对电极系统的影响。对于液体培养基和稀释液，通常可以在25°C下，或者在其使用时的温度下调整和测定pH值。琼脂培养基必须在溶解后进行pH的调整，因此应在其使用温度确定pH1。
电极选择：使用平头的复合电极，并手动校准pH计的温度补偿。避免过度加热，如果脱水的琼脂培养基在再次溶解或制备过程中必须调整pH，则应在灭菌操作步骤之后用过滤灭菌的盐酸和氢氧化钠溶液进行调整，以避免因再次灭菌造成的培养基过度加热