发酵液长菌

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生物制品单抗，规模200L各项监测指标都正常，同样物料相同供应商，扩到2000L规模时，上到2000L罐发酵液就长菌，过程中使用的都是一次性袋子，也是无菌连接和转移，请问各位老师这个长菌调查思路应该是什么？最有可能出问题的点在哪里

懒鱼君君

配液和转移方式都一致的话，先查袋子完整性、电极插口、取样口。搅拌桨如果是磁力耦合控制的，也要看一下有没有摩擦损伤，还有如果培养过程泡沫多，接触到排气口也有染菌风险。还有空气管路也不是200L管路吧，这段管路是不是有问题，空气滤器做下完整性看看。
然后正常的话应该会预先打空培养基平衡一天吧，不行就多平衡一两天看长不长菌，不长的话2000L系统本身应该没问题
200L也可以留点样取出来放摇瓶培养观察一下，有可能前期指数期细胞生长旺盛，杂菌不占优势没体现出来，上2000L 10倍扩增，细胞被稀释后一下子被打败了
反正就是找差异，每个环节逐一分析吧

hanmenglei

关注点是2000L是不是一次性袋子，如果不是，需要分析，第二点如果是赛多反应器，电极是一次性的可以不用分析电极的事情，2000L污染多少批次，如果只是一批次可以重新再试一下，2批次以上就算了，分析过滤器与袋子连接比较好，另外就是接种后多长时间污染，接种前200L取样是否无菌保存，2000L取样方式是什么？无菌取样器，还是多连取样袋？建议这几个方向，第三就是，空气滤器使用后完整型检测一下

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hanmenglei 发表于 2025-4-3 13:43
关注点是2000L是不是一次性袋子，如果不是，需要分析，第二点如果是赛多反应器，电极是一次性的可以不用分 ...

不是赛多的反应器，三批，每批都是十天左右就开始长菌，200L时检测无菌都没有问题，2000L和200L取样方式是一样的保存及运输方式都一样。

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懒鱼君君 发表于 2025-4-3 13:37
配液和转移方式都一致的话，先查袋子完整性、电极插口、取样口。搅拌桨如果是磁力耦合控制的，也要看一下有 ...

上2000L，稀释后为什么容易染菌？