新液相色谱柱理论塔板数降低

若素

新买的岛津C18液相色谱柱，第一次做样的时候还是正常的，柱效都不错，但第二次做样时理论板数就降到4800左右（第一次是11000），相应的分离度、拖尾都不好了。我们的流动相是带缓冲盐的，在走流动相前用的10%甲醇冲洗的，进样完成后依然用的是10%甲醇冲洗1小时再用100%甲醇冲洗1小时。请各位帮帮忙，看能有什么办法把柱效提高，不能就这样报废一新柱子吧？？@巴西木 @hongwei2000 @yuansoul  拜托各位大侠了

巴西木

第二次做样时理论板数就降到4800左右（第一次是11000），相应的分离度、拖尾都不好

---------其实液相色谱柱这样是正常的，你的操作也是正确的。新柱子一般都会出现这种情况。液相色谱柱的柱效在几千是正常的（按照自己的液相方法检测样品）。气相色谱柱在使用前一般都要老化，使固定相变得更稳定。液相色谱柱在使用几次后，柱效一般会稳定在一个波动很窄的范围内。

wjcking123

你的流动相，有机相的比例是多少？如果低于10%，你第一次使用完毕后，就不应该用10%的甲醇冲洗。

yuansoul

有保护住么？进样是否有滤膜过滤。。。

咕咕

流动相有机系比例高于10％吗？估计盐未走完出来。

Action医生

学习学习、、、、、、、、、、

夜风.

你的盐缓冲液浓度是多少的，也有可能是堵塞啦，仪器是什么型号的

来自:Android客户端

若素

﹎馍粒 发表于 2014-8-15 07:45
你的盐缓冲液浓度是多少的，也有可能是堵塞啦，仪器是什么型号的

来自:Android客户端

缓冲盐是0.05%的磷酸二氢钾，仪器是岛津的2010

若素

wjcking123 发表于 2014-8-14 19:35
你的流动相，有机相的比例是多少？如果低于10%，你第一次使用完毕后，就不应该用10%的甲醇冲洗。

有机相是70%

若素

yuansoul 发表于 2014-8-14 21:10
有保护住么？进样是否有滤膜过滤。。。

有的，但过滤的时候是把流动相混合后用有机滤膜过滤的

yuansoul

若素 发表于 2014-8-15 08:26
有的，但过滤的时候是把流动相混合后用有机滤膜过滤的

一直这样做？好像不太好

若素

yuansoul 发表于 2014-8-15 08:47
一直这样做？好像不太好

应该缓冲盐（0.05%磷酸二氢钾）用水系过滤，甲醇用有机过滤后再混合么？那混合中缓冲盐会不会有析出的可能

yuansoul

若素 发表于 2014-8-15 08:51
应该缓冲盐（0.05%磷酸二氢钾）用水系过滤，甲醇用有机过滤后再混合么？那混合中缓冲盐会不会有析出的可能 ...

，。。。。好像咱俩说岔了。。我是问检测的样品溶液是否过滤了。

夜风.

嗯 是的 你的样品是什么性质的

若素

yuansoul 发表于 2014-8-15 08:56
，。。。。好像咱俩说岔了。。我是问检测的样品溶液是否过滤了。

过了，用针头过滤器过的

若素

﹎馍粒 发表于 2014-8-15 09:05
嗯 是的 你的样品是什么性质的

样品是穿琥宁

夜风.

若素 发表于 2014-8-15 09:22
样品是穿琥宁

不大了解这个性质的  应该不会有什么反应产生易堵塞之类物质

yuansoul

若素 发表于 2014-8-15 09:20
过了，用针头过滤器过的

你用老柱子本样品再进几针看看是否和以前没有区别。如果没有区别，你目前的柱子有问题了。找供应商换货。

若素

yuansoul 发表于 2014-8-15 09:27
你用老柱子本样品再进几针看看是否和以前没有区别。如果没有区别，你目前的柱子有问题了。找供应商换货。

现在出现这个问题了，今天我用苯-甲醇进样了（苯就1滴溶在100ml甲醇中），出来的峰理论板数有10000多，就拖尾大点，1.08左右。看来是流动相或是样品本身的问题了吧？

若素

﹎馍粒 发表于 2014-8-15 09:25
不大了解这个性质的  应该不会有什么反应产生易堵塞之类物质

以前一直都那样做的，就这次换了新柱就出问题了