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【小疑问解答3】什么叫elisa?夹心法?

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药生
发表于 2012-9-8 12:39:28 | 显示全部楼层 |阅读模式

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本帖最后由 仲夏秋夜云 于 2012-9-8 12:41 编辑

这个问题……可以百度一下。但是很多新人,百度之后,依然不明白,说是看着头晕……
百度内容:enzyme linked immunosorbent assay,ELISA。指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (enzyme-linked immunosorbent assay , ELISA) 。ELISA现在已成为目前分析化学领域中的前沿课题 ,它是一种特殊的试剂分析方法,是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术

恩……我来解释一下简单的夹心法的原理。

首先,我们要测试一种药物,这种药物也就是样品啦,其中的有效成分可以取个名字,比如说S。含有S药物,可能是某种蛋白质,某种细胞的上清,总之呢,成分不可能像化学药那样单纯,生物药么,初步检测的时候,总有些其他结构和成分的。

我们先在一块板上,铺满一种A抗体,这种A和S中,有效成分特异性结合,只结合S。A是铺满的,也就是远远过量的,就将一定量的药物加入,让药物里的S轻松的,主动的,尽可能多地和A结合上。然后用洗液冲洗板子,没有和A结合上的东西也就被冲掉了。

然后呢,在板子上加入一种B成分,这种B和S也是特异性结合,但是和A是相排斥的。可以理解成,A和B都能特异性结合S,但是AB异性相斥。

B比较特别,加入显色剂、硫酸之后,就会变成蓝紫色或者红色。

把大量的B加入板子,板子里原本就有A和S。A是铺满整个底部的,上面S特异性结合了,现在加入B,B和S结合,顶在S的头顶上……用洗液洗一下,没有结合上的B也洗掉了。

然后加入显色剂、硫酸。显色。B的含量越多,颜色越深。
使用分光光度计测试透光度,和标准品比较,就能得出B的含量,同时推定S的量。

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大师
发表于 2012-9-8 13:51:00 | 显示全部楼层
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药徒
发表于 2012-9-8 14:04:38 | 显示全部楼层
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药生
发表于 2012-9-8 14:09:55 | 显示全部楼层
明白,解释的很通俗,很容易看懂,楼主辛苦啦
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药生
发表于 2012-9-8 15:04:52 | 显示全部楼层
{:soso_e113:}挺有老师的潜质,课上得8错!
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宗师
发表于 2012-9-8 15:18:24 | 显示全部楼层
讲解的不错。
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药徒
发表于 2014-12-18 21:06:51 | 显示全部楼层
原来如此 老师讲的通俗易懂!
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