关于黄柏含量测定黄柏碱

小影1 · 发表于 2023-3-3 12:01:03

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想问一下这种流动相中含有离子对试剂十二烷基磺酸钠的平衡时间需要多久的，我平衡了6个小时，基线都还是有一点往下飘，然后开始跑序列以后每一针的保留时间都会比前一针往后漂移，请问一下大家，有遇到这样的情况吗，有什么解决办法吗，我走的单泵跑

门门 · 发表于 2023-3-3 12:08:12

没办法。
但可以出个主意：
找卖色谱柱的，让他们给你做，谁做得相对来说更好你就买谁家柱子。

小影1 · 发表于 2023-3-3 12:57:24

门门发表于 2023-03-03 12:08
没办法。
但可以出个主意：
找卖色谱柱的，让他们给你做，谁做得相对来说更好你就买谁家柱子。

请问一下这个保留时间每一针都延后，调节色谱参数有机相比例、酸碱度什么的其实是不是其实作用不大？

henryizhao · 发表于 2023-3-3 15:01:11

没走过十二烷基硫酸钠这种离子对试剂的色谱柱，第一次平衡确实需要很久

建议耐心等待吧。可以考虑过夜

下次使用前平衡，会快一些

小影1 · 发表于 2023-3-3 15:17:10

henryizhao 发表于 2023-03-03 15:01
没走过十二烷基硫酸钠这种离子对试剂的色谱柱，第一次平衡确实需要很久

建议耐心等待吧。可以考虑过夜

下次使用前平衡，会快一些

流动相平衡过夜，第二天再正常跑样？
因为我前面做小檗碱的时候这个大概平衡4小时就可以，不过乙腈跟水相溶剂的比例不一样，和加的十二烷基磺酸钠的量也不一样

henryizhao · 发表于 2023-3-3 15:23:58

小影1 发表于 2023-3-3 15:17
流动相平衡过夜，第二天再正常跑样？
因为我前面做小檗碱的时候这个大概平衡4小时就可以，不过乙腈跟水相 ...

有的品种低流速流动相过夜平衡即可
有的品种需要通过重复进样品来平衡
你可以先试试前者

做小檗碱是同一根柱子吗？

小影1 · 发表于 2023-3-3 15:33:09

henryizhao 发表于 2023-03-03 15:23
有的品种低流速流动相过夜平衡即可
有的品种需要通过重复进样品来平衡
你可以先试试前者

做小檗碱是同一根柱子吗？

对的。跟做小檗碱是同一根色谱柱

henryizhao · 发表于 2023-3-3 15:35:25

小影1 发表于 2023-3-3 15:33
对的。跟做小檗碱是同一根色谱柱

那可能是黄柏碱方法的离子对试剂浓度更高？

小影1 · 发表于 2023-3-3 15:37:15

henryizhao 发表于 2023-03-03 15:23
有的品种低流速流动相过夜平衡即可
有的品种需要通过重复进样品来平衡
你可以先试试前者

做小檗碱是同一根柱子吗？

我试了几针才开始跑序列的，因为出峰时间比较早，但样品其他成分峰比较多要45分才可以跑完，当时试了两针对照出峰时间还是相对稳定的，没想到延长跑样时间后，就每一针都延后0.1左右

30304880 · 发表于 2023-3-3 15:41:44

有个小tip，有的会在流动相里人为添加一些黄柏碱，然后把废液管插回到流动相瓶中，用来平衡柱子。我也是听说的，具体没试过啊。你可以找一个废柱子先试试效果。

小影1 · 发表于 2023-3-3 15:46:55

henryizhao 发表于 2023-03-03 15:35
那可能是黄柏碱方法的离子对试剂浓度更高？

对的，对比小檗碱加的量翻倍了

小影1 · 发表于 2023-3-3 16:11:34

30304880 发表于 2023-03-03 15:41
有个小tip，有的会在流动相里人为添加一些黄柏碱，然后把废液管插回到流动相瓶中，用来平衡柱子。我也是听说的，具体没试过啊。你可以找一个废柱子先试试效果。

这个岂不是等同于把目标成分加进去流动相让它提前适应？正常跑样峰面积也相对应全部增加吧

smilechildren · 发表于 2023-3-3 16:29:04

机混吗？要是机混的话，换成手混试试，大概平衡4h差不多就OK了

小影1 · 发表于 2023-3-29 11:38:46

smilechildren 发表于 2023-03-03 16:29
机混吗？要是机混的话，换成手混试试，大概平衡4h差不多就OK了

我都是手混的，走单泵，已经试过平衡过夜再跑还是不行，每一针都延后，感觉是色谱柱不合适，请问你做过这个品种吗，用的是什么牌子型号的色谱柱啊？

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