单抗产品cief检测中酸性峰和碱性峰问题

beiying1007

请教各位，

请问单抗产品CIEF检测中的酸性峰杂质和碱性峰杂质分别对应的是产品中的哪些杂质？
这些杂质在生产过程中是怎么产生和去除的？

谢谢！

duaaaaaa

按个人的理解，单抗是大分子，比较复杂，无论是酸性峰杂质还是碱性峰杂质就是某些氨基酸异化了导致单抗的等电点或空间电荷分布不同了的类似“单抗”的东西；这些杂质一般产生在细胞培养阶段，在纯化或制剂工序如果有聚体产生、降解的现象，一般也会伴随电荷变体的产生。去除主要在细胞培养阶段吧，例如在细胞培养阶段降温可以降低单抗的酸性电荷变体、还有一些像是提高Cu2+或降低Zn2+金属离子的含量也会增加单抗的碱性电荷变体；纯化一般无能为力（理论上用分辨率比较高的弱阳填料可以分离pI为弱碱性的单抗电荷变体），或者不要让样品处于等电点的pH的缓冲体系中。我做过一个项目，拉ICIEF检项的Trend，5批下来在阳离子后酸碱峰都降低了，主峰都会提高。

darlun

可参考  GMP认证指南 无菌制品下册  生物制品章节
酸性组份 可能由脱酰胺、氧化、糖化、唾液酸化等修饰组成。

来源于 生产工艺，中间产品/原液/制剂贮存

详见P945  电荷变异体的产生 检测。。。

治疗性单克隆抗体电荷异质性分析方法比较 *
王文波，武刚，于传飞，张峰，刘春雨，李萌，陈伟，郭莎，高凯，王兰 **
（中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室，卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室，北京 100050）
单克隆抗体在其复杂的生产及存储过程中能产生大量的修饰和改变，如氧化 / 脱酰胺［1］、糖基化［2］、C 末端赖氨酸截除［3］、N 末端焦谷氨酸环化［4］等，造成抗体在电荷分布方面的异质性，这些修饰对抗体活性、免疫原性及药代动力学均有影响，同时也是整个生产工艺的重要指征。因此电荷变异体是抗体质控中关注的重点，对其进行有效的质量控制是十分必要的。