蛋白表达量和蛋白浓度的区别？

pugongying0535

蛋白表达量是titer 跟蛋白浓度（含量）有什么区别?测titer和含量的仪器是一样的吧？

lzq050628

单位不一样

Maybe12345678

1.测表达量一般是对发酵液中目的蛋白浓度的测定，由于此时样品成分复杂，无法使用UV280方法检测，我们使用液相方法
2.常规样品蛋白浓度测定，如果不影响紫外吸光度的话，会使用UV分光光度计，简单快速（准确度差），如果对准确度要求高的，也可以使用液相方法
3.使用仪器不一定相同

pugongying0535

Maybe12345678 发表于 2024-3-5 11:02
1.测表达量一般是对发酵液中目的蛋白浓度的测定，由于此时样品成分复杂，无法使用UV280方法检测，我们使用 ...

发酵液中目的蛋白为啥只有1.2g/L啊？但是最后的含量是10g/L

Maybe12345678

pugongying0535 发表于 2024-3-5 11:25
发酵液中目的蛋白为啥只有1.2g/L啊？但是最后的含量是10g/L

样品体积不一样啊  大哥，发酵液体积几百到几千升不等，最终经纯化后样品大概只有几十升吧

window

一般说 两个首先检测方法不同
表达量大多采用电泳技术 通过目标条带 与所有总条带比值来计算
蛋白浓度大多采用的是比色法，利用特定反应特定波长来计算蛋白量 这一般是所有此类蛋白的总浓度

pugongying0535

Maybe12345678 发表于 2024-3-5 11:27
样品体积不一样啊  大哥，发酵液体积几百到几千升不等，最终经纯化后样品大概只有几十升吧

好的谢谢，那也就是说表达量就是含量也就是浓度啦？这三者是等同的对吧？

Maybe12345678

pugongying0535 发表于 2024-3-5 13:43
好的谢谢，那也就是说表达量就是含量也就是浓度啦？这三者是等同的对吧？

检测目的相同，只是检测方法和设备可能相同或不同

张寅

虽然都是测蛋白的量，但我觉得意思不太一样。
表达量其实想表达的意思是，这么多菌体，产出了多少蛋白。
蛋白浓度一般都是到纯化步骤了，是看这个溶液里有多少蛋白。

PGYPGYPGY2021

张寅 发表于 2024-03-07 13:40
虽然都是测蛋白的量，但我觉得意思不太一样。
表达量其实想表达的意思是，这么多菌体，产出了多少蛋白。
蛋白浓度一般都是到纯化步骤了，是看这个溶液里有多少蛋白。

楼主好问题啊。我也一直不理解。。。。
好像在化药里，titer是定量衡量多组分物质生物学功能的，单一组分的用浓度更合适。到生物药里，抗体其实也算是多组分，也会测生物学功能，但是没有真正把蛋白质量与生物学功能关联期间折算成真正的titer效价。所以，个人理解，不管是发酵还是纯化，用蛋白产量或浓度更合适。

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PGYPGYPGY2021

PGYPGYPGY2021 发表于 2024-03-22 19:21
楼主好问题啊。我也一直不理解。。。。
好像在化药里，titer是定量衡量多组分物质生物学功能的，单一组分的用浓度更合适。到生物药里，抗体其实也算是多组分，也会测生物学功能，但是没有真正把蛋白质量与生物学功能关联期间折算成真正的titer效价。所以，个人理解，不管是发酵还是纯化，用蛋白产量或浓度更合适。

楼主好问题啊。我也一直不理解。。。。
好像在化药里，titer是定量衡量多组分物质生物学功能的，单一组分的用浓度更合适。到生物药里，抗体其实也算是多组分，也会测生物学功能，但是没有真正把蛋白质量与生物学功能关联起来折算成真正的titer效价。所以，个人理解，不管是发酵还是纯化，用蛋白产量或浓度更合适。

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wxzl

从 分类上来说，上游细胞配液那边用titer，主要是为了侧重：生产过程的产出效率。 而在下游的蛋白纯化那边用conc.，主要为了侧重：样本中蛋白的具体浓度值。
还有就是单位，前者是mg/L，后者mg/ml，也是为了纯化后蛋白浓度的提高，对应后续单位的压缩。

天下冇赖同学

一个在上游 一个在下游

轩云溪

看看大家怎么回复的，就是来学习的