液相的出峰时间后移，保留性增加问题

123升水

检测使用的是反向色谱系统，梯度洗脱，流动相乙腈和磷酸缓冲液。
目前遇到的问题是，目标物出峰时间后移，保留性增加。
排除了系统进气泡问题，更换了新的色谱柱，更换了新的流动相，检测了系统压力，和漏液都没有问题。
不知道怎么搞了，请教各位大神，有没有其他原因造成的这种现象。
出峰时间后移后，保留时间很稳定。


补充内容 (2024-5-8 17:54):
找到原因了。乙腈放时间长了，过期了

123升水

抗争少年 发表于 2024-4-29 15:08
不太懂液相，我从有机合成角度想，你是反向柱，也就是极性小的物质先出峰？我能想到的是出峰时间后移，是因 ...

我们用的是自动混合比例阀，应该不是这个问题。不过我们也考虑这个问题，把相同的流动相用到另一台液相是正常出峰的。

18186386804

有需要更换其他品牌的对照品吗？

过渡々

A/B/C/D四个泵通道的话  换通道试    或者乙腈盐混合好了，用单通道试

火舞精灵

比例阀不准了

loveaysl

管路接头微渗，流动相未混合均匀，温度变化都有可能导致这个情况。根据经验来说热水冲冲系统，超声下流动相，重接下色谱柱，第二天应该就能正常了

123升水

火舞精灵 发表于 2024-4-29 16:01
比例阀不准了

刚买的仪器，不到半年

123升水

loveaysl 发表于 2024-4-29 16:09
管路接头微渗，流动相未混合均匀，温度变化都有可能导致这个情况。根据经验来说热水冲冲系统，超声下流动相 ...

我能说这种情况是热水冲洗过后，出现的情况吗？

loveaysl

123升水 发表于 2024-4-29 16:13
我能说这种情况是热水冲洗过后，出现的情况吗？

岛津的仪器？脱气包，比例阀接头处紧固一下试试，才买半年，出现这情况报修就好了啊

Hiqr1e932p

排除上述原因后，可以看看流动相瓶沉子，可能有长菌堵塞的情况，使得流动相混合比例变化，更换沉子或灭菌清洗或能解决

123升水

Hiqr1e932p 发表于 2024-4-29 16:32
排除上述原因后，可以看看流动相瓶沉子，可能有长菌堵塞的情况，使得流动相混合比例变化，更换沉子或灭菌清 ...

五一过后来试试，明天放假了

抱琴揽风

如果流动相配液没有问题的话，这种情况考虑可能是比例阀不太准，如果不怕麻烦就做一些泵流量误差和流量稳定性以及梯度误差去彻底排查一下。

猫星人

遇到目标物出峰时间后移，保留性增加的问题，在排除了系统进气泡、更换了色谱柱、流动相，并检查了系统压力和漏液后，可能的原因还有以下几点：

1. 温度影响
温度是影响色谱柱分离时间的重要因素之一。一般来说，温度越高，色谱分离越快，保留时间越短；反之，温度越低，色谱分离越慢，保留时间越长。如果在实验过程中，实验室温度发生了变化，比如早上上班时温度较低，然后逐渐升高，这可能导致色谱峰保留时间逐渐变长。因此，确保实验时实验室温度稳定，避免温度波动，可以考虑使用柱温箱来控制温度。

2. 流动相成分影响
对于反相色谱来说，流动相中有机相的成分含量越高，色谱峰保留时间越短；反之，保留时间越长。如果流动相的组成发生了变化，比如有机相的含量减少，可能导致保留时间增加。确保流动相的组成正确，并检查是否存在流动相老化或改性剂降解的情况。

3. 流速影响
流速也是影响色谱分离的重要因素之一。在允许的范围内，流速越大，色谱分离越快。如果系统单向阀或泵出现问题，或者流路堵塞，可能导致流速变慢，从而引起保留时间增加。检查并确保系统的流速正常，可以考虑使用在线脱气机来控制流动相中的气泡。

4. 系统延迟体积
较大的系统延迟体积（梯度延迟）可能导致保留时间增加。这可能是由于系统中的某些组件，如单向阀或梯度比例阀出现问题引起的。检查并确保这些组件正常工作，可以考虑进行动态渗漏测试来排除系统渗漏的可能性。

5. 流动相pH值
流动相的pH值也会影响保留时间。对于弱碱性分析物，在高于其pKa 2个pH单位或更高pH的条件下进行中和时，保留时间更长；而对于弱酸性分析物，在低于其pKa 2个pH单位或更低的pH值下进行中和时，保留时间更长。确保流动相的pH值正确，并根据分析物的性质进行调整。

123升水

抱琴揽风 发表于 2024-4-29 16:38
如果流动相配液没有问题的话，这种情况考虑可能是比例阀不太准，如果不怕麻烦就做一些泵流量误差和流量稳定 ...

好的，如果是比例阀的问题，它的出峰时间应该是会呈漂移状态吧。但是我们的出峰时间很稳定

抱琴揽风

123升水 发表于 2024-4-29 16:13
我能说这种情况是热水冲洗过后，出现的情况吗？

不知道你是用多高的水温冲洗系统管路的，影响因素确实比较多，需要逐个去排查一下。

抱琴揽风

123升水 发表于 2024-4-29 16:41
好的，如果是比例阀的问题，它的出峰时间应该是会呈漂移状态吧。但是我们的出峰时间很稳定

不一定就是漂移状态，如果出峰时间很稳定相对来说好排查一些，如果是随机的，就比较麻烦。你可以从保留时间推迟的那个出峰开始排查，看看那个推迟出峰的梯度洗脱比例是多少，针对性去做一下泵及比例阀的流量排查，看看比例阀的取液是否准。

123升水

loveaysl 发表于 2024-4-29 16:18
岛津的仪器？脱气包，比例阀接头处紧固一下试试，才买半年，出现这情况报修就好了啊

安捷伦的，先尝试自己找一下原因，找不到就交给售后了

123升水

抱琴揽风 发表于 2024-4-29 16:59
不一定就是漂移状态，如果出峰时间很稳定相对来说好排查一些，如果是随机的，就比较麻烦。你可以从保留时 ...

好的，谢谢