菌悬液制备

Zzz123#

1、三代磁珠划线至TSA上培养24-48h为4代，用接种环取4代上的菌至TSB培养18-24h为五代，梯度稀释菌悬液至所需浓度。2、还是直接取四代上的菌至生理盐水，与标准比浊液做对比呢？按药典来说是不是第一种方法就不是新鲜培养物了？

迷之久远

4代即可。没有额外的规定。

ALPACA

1. **关于培养物代数和状态**
   - 在第一种方法中，经过从TSA平板培养（三代磁珠划线至TSA培养24 - 48h得到四代菌），再转接到TSB培养18 - 24h得到五代菌，然后梯度稀释菌悬液。这种方式得到的菌悬液严格来说不是直接从四代新鲜培养物制备的。因为中间经过了额外的在TSB中的培养步骤，菌的生理状态和特性可能已经发生了一些变化。
   - 根据药典对于“新鲜培养物”的定义，通常是指在适宜的培养基上经过较短时间培养得到的，能够准确反映菌株原有特性的培养物。第一种方法中的操作使得菌经历了更多的生长周期和环境变化。
2. **第二种方法与药典要求的关系**
   - 第二种方法直接取四代上的菌至生理盐水，与标准比浊液做对比，更符合对新鲜培养物的要求。这种方式可以在菌处于相对“新鲜”的状态下，通过比浊的方法来确定菌悬液的浓度。因为它没有经过额外的如第一种方法中TSB长时间培养的过程，能够更好地保证菌的生理状态接近在TSA平板上培养得到的四代菌的初始状态，更有利于准确地进行微生物计数等操作。

总体而言，第一种方法得到的不是严格意义上的新鲜培养物，而第二种方法相对更符合药典对于使用新鲜培养物进行相关操作（如菌悬液浓度确定）的理念。在实际微生物检验等操作中，应根据具体的实验目的、要求以及药典规定来选择合适的方法。

八档丶电风扇

两种方法都是新鲜培养物，区别只是你的菌悬液制备方式不一样，第一种是第五代新鲜菌悬液，使用缓冲液稀释菌液不会使菌液不新鲜，第二种直接从培养出的平皿去菌溶解到缓冲液，只是少传了一代，