药品培养基的质量控制真相（三）

沁人绿茶.

撰稿 | 石决明
来自 | 蒲公英Ouryao   
2020年版中国药典指导原则9203的“培养基”部分修订中首次收录了“商业化的预制培养基”。可是4年来，我们并没有完全发挥出预制培养基即用性的优势，甚至要求跟脱水培养基一样进行质量控制，这是不合适的。

为什么这么说呢？就需要了解一下预制培养基的全生命周期以及相应质量控制的重点。  


预制培养基的全生命周期如上图所示。为了行文方便重点突出，下文中的预制培养基仅代表成品琼脂培养基平板，预制液体培养基在此不讨论。 1原料控制  预制培养基的原料其实就是大份量包装的脱水培养基，还有的是基础的脱水培养基+关键添加剂的模式。培养基制备用水需符合纯化水的要求。
2配制灭菌  琼脂类培养基的配制灭菌过程大概分为以下四步。


工业化配制的体积会比实验室规模要大，所以一般会采用工业化的培养基制备仪：就是加了搅拌桨和冷却装置的灭菌锅。搅拌桨一方面可以在脱水培养基溶解阶段加速溶解，另一方面，通过在加热阶段连续搅动培养基，克服了大体积灭菌琼脂热穿透性差的问题。

湿热灭菌程序不一定是我们实验室常见的121℃15分钟。不同的厂家会根据培养基制备的体积大小和设备特性差别调整具体的灭菌温度和时间。此外，培养基制备仪腔体外还有环状水冷却，也会显著减少冷却时间。但是为了防止出现局部过冷产生琼脂片凝固，此类设备也要进行有效验证。  更好的操作是将不耐热的成分分开灭菌后，在无菌分装之前再添加混匀。无菌分装的大体流程可以参考如下示意图。  

生产商的关键控制参数有：  

a)  培养基制备仪分装温度、分装体积  

b)  冷却空气温度及洁净度  

c)  传送带速度（转化为冷却时间）  这是一个工业化生产的过程，并不是简单粗暴的越快越好，越冷越好。而琼脂的凝结效果也不是仅仅靠凝胶强度可以体现的。  

思考提示：很多东西并没有明确的终端控制的指标，这时候只有关注生产过程。

如果是终端辐照灭菌的预制培养基，生产步骤后面还有一步终端灭菌。


  
辐照灭菌和湿热灭菌并不是一个层级，必须对灭菌剂量进行有效验证。不然用辐照灭菌的预制培养基比对上湿热灭菌的对照培养基，你会得到一个意想不到的结果。  
3.  质控放行  理化指标：包括感官性状（培养基应透明无杂质，更好的操作是将透明度和颜色转化为数值进行控制）、装量、最终pH值、凝胶强度、水分活度。  微生物指标：包括无菌性检查和适用性检查。重点是必须按照中国药典的要求使用中检院出品的对照培养基。  质控放行的取样代表性必须体现，例如无菌分装的前段中段末段以及异常停机段等等。而辐照灭菌取样更多的应该是辐照的不同位置。
4.  储存运输  必须承认预制培养基在储存期间，理化指标和微生物指标都会变差。所以临床用的预制培养基一般都推荐2-8℃保存。药品用预制培养基为了便于储存和运输，保存条件一般放宽到2-25℃.这一点你需要确认生产商的验证报告。  包装的要求更为严格，至少要避光和提供一定强度的机械保护，更多的是满足不同用户的使用场景要求。
  5.  内部验收  内部验收时确保接收的预制培养基的品名、批号、数量以及生产单位与订单或合同中的要求一致。确认好出厂报告和储存运输记录。至于理化指标和微生物指标可以参考出厂报告进行，重要的一点是添加环境分离菌提高区分度和目的性。环境分离菌添加优先级参考：[color=var(--weui-LINK)]药品培养基的质量控制真相（一）  
6.  储存使用  按照预制培养基说明书标示条件进行内部储存。避免将培养基储存在温度波动较大的地方，如冰箱门上或靠近冷冻室的后壁。避免冻结：含琼脂的预制培养基不应在0°C以下储存，以免破坏琼脂的凝胶结构。避光保存：某些培养基对光照敏感，可能需要避光保存，以防止成分分解。注意先进先出，做好库存管理。