医疗器械的无菌检验

栀子花香呀香

请问各位老师，无菌检验想用薄膜过滤法，提取洗脱液的方法跟初始污染菌方法一样吗？

来自苹果APP客户端

cjf198703

看方法学验证的方法是不是采用的一个洗脱方法

世间始终你好

关于**无菌检查中使用薄膜过滤法时洗脱液的提取方法**，你提到的“是否跟初始污染菌方法一样”，这个问题涉及的是**方法学的不同用途背景**，我们需要分清楚两种情境：


**1. 无菌检查用薄膜过滤法：**

是**正式检验项目**，依据药典（如中国药典、USP、EP）执行，目的是判断被检品是否含有可培养活菌。

洗脱步骤或洗涤液提取的要求如下：

* 使用药典规定的**膜冲洗液（rinsing fluid）**，比如**胰酪大豆胨液（TSB）、无菌生理盐水、缓冲液等**，根据样品特性选择。
* 冲洗次数通常为**3\~5次**，每次约100mL（可根据药典或验证调整）。
* 冲洗目的是去除抑菌成分，确保**样品本身的抗菌性被稀释至不干扰结果**。

**重点是“抑菌成分的去除”与“最大程度保留污染菌”**。



**2. 初始污染菌（Initial contamination）测定：**

这是**微生物限度检查**的一部分，目的是确认样品中原始微生物数量，不同于无菌检查（有则不合格）。这时常用的是：

* **薄膜过滤法 + 洗脱收集** 或者
* **直接接种、平板计数法**

洗脱液提取方式：

* 同样可以通过过滤后的冲洗收集液做平皿计数
* 但关注点是**最大限度地将菌洗脱下来用于计数**



结论：两者相似但不能等同

| 比较点      | 无菌检查（薄膜过滤法）       | 初始污染菌检查     |
| -------- | ----------------- | ----------- |
| 目的       | 检查有无活菌（0容忍）       | 检查微生物数量     |
| 洗脱液用途    | 去除抑菌成分，转移到培养基     | 保留微生物用于计数   |
| 是否需要完全洗净 | 是，为避免抑菌干扰         | 是，为计数准确     |
| 是否相同方法   | 类似，但目的不同，操作细节可能调整 | 类似，但更关注菌回收率 |



补充建议：

若你要用薄膜过滤法做无菌检验：

* **务必做方法学验证**（如回收率验证、抑菌验证），验证洗脱液、次数、体积是否合适。
* **洗脱方式（冲洗）可以参考初始污染菌的方法学步骤，但需要根据药典规定优化，并做微生物回收验证**。
* 若样品有抗菌成分，建议使用**无菌水或生理盐水 + Tween 80 或其他中和剂**来冲洗膜片。

依然星期三

做方法适用性试验

mopiaoxiang

医疗器械推荐直接接种法，不行再用薄膜过滤法。

少年不年少

mopiaoxiang 发表于 2025-7-13 13:22
医疗器械推荐直接接种法，不行再用薄膜过滤法。

这句话哪里有依据吗？还是经验之谈？

a540909367

mopiaoxiang 发表于 2025-7-13 13:22
医疗器械推荐直接接种法，不行再用薄膜过滤法。

是有这么句话，但是想不起来哪里的了，不想去翻了

Blackntz

环氧乙烷灭菌结束后需要等环残合格再做做PCD的培养及无菌吗

mopiaoxiang

少年不年少 发表于 2025-7-14 08:39
这句话哪里有依据吗？还是经验之谈？

北京市医疗器械无菌检验检查要点指南 里的

jianing4233312

mopiaoxiang 发表于 2025-7-13 13:22
医疗器械推荐直接接种法，不行再用薄膜过滤法。

无菌检验方法包括薄膜过滤法和直接接种法。只要供试品性质允许，对于医疗器械类产品，应优先采用直接接种法。进行供试品无菌检验时，应进行方法适用性试验。供试品无菌检验所采用的检查方法和检验条件应与方法适用性试验确认的方法相同。

jianing4233312

专门确认了一下，
1.北京市医疗器械无菌检验检查要点指南：无菌检验方法包括薄膜过滤法和直接接种法。只要供试品性质允许，对于医疗器械类产品，应优先采用直接接种法。进行供试品无菌检验时，应进行方法适用性试验。供试品无菌检验所采用的检查方法和检验条件应与方法适用性试验确认的方法相同。

2.药典无菌检查法：供试品的无菌检查无菌检查法包括薄膜过滤法和直接接种法。只要供试品性质允许，应采用薄膜过滤法，包括水溶性液体供试品、醇类和油性供试品，或可在水或油性溶剂中溶解的供试品等。供试品无菌检查所采用的检查方法和检验条件应与方法适用性试验确认的方法相同。