微生物菌悬液

初斑 · 发表于 2016-6-15 22:13:17

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大神们，你们的菌悬液都怎么做的，直接从第五代斜面刮取还是怎么滴？药典上说的新鲜培养，是不是意味着每天都要做个新鲜培养物，以防第二天有样来检？有没有什么别的更方便的方法？问的问题比较多，谁能说下具体操作最好了，非常感谢——一只菜鸟

温暖的小萝卜头 · 发表于 2016-6-16 07:38:55

我们是从第三代斜面刮取菌苔，然后用中检所的比浊管比浊来稀释至需要的浓度的，网上有操作说明书；新鲜培养，我们制备的斜面比如细菌的培养18小时后放冰箱保存，就算是新鲜的，有效期我们暂定一周，每次接种斜面的时候多传几支，一次取一支来用不放回。

温暖的小萝卜头 · 发表于 2016-6-16 07:39:32

感觉液体培养基制备菌悬液的话，不是很稳定。

351482665 · 发表于 2016-6-16 14:45:44

我们是提前一天接种传代，当天制备当天用完，不储存。

夜夜夜夜 · 发表于 2016-6-16 15:46:50

要求应该是1天培养，就是头1天制菌液，生化培养箱培养1天，第2天再用，一般3代就开始可以用了

夜夜夜夜 · 发表于 2016-6-16 15:48:07

有样头1天应该知道吧，当天来就先放冷藏柜第2天捡

初斑 · 发表于 2016-6-16 22:08:33

温暖的小萝卜头发表于 2016-6-16 07:38
我们是从第三代斜面刮取菌苔，然后用中检所的比浊管比浊来稀释至需要的浓度的，网上有操作说明书；新鲜培养 ...

保存时间一周？这个需要进行验证么？验证菌活力为一周

初斑 · 发表于 2016-6-16 22:11:13

温暖的小萝卜头发表于 2016-6-16 07:39
感觉液体培养基制备菌悬液的话，不是很稳定。

那您的意思是用固体培养么？固体培养的话，刮取多少也是有一定的误差。额，也有可能是技术问题

液体的话，我们直接移取一定的量，大概可以确定个稀释级了。

初斑 · 发表于 2016-6-16 22:12:22

351482665 发表于 2016-6-16 14:45
我们是提前一天接种传代，当天制备当天用完，不储存。

当天制备？你们是从头天传代的斜面上直接做菌悬液是么

初斑 · 发表于 2016-6-16 22:12:44

夜夜夜夜发表于 2016-6-16 15:46
要求应该是1天培养，就是头1天制菌液，生化培养箱培养1天，第2天再用，一般3代就开始可以用了

嗯嗯。非常感谢

初斑 · 发表于 2016-6-16 22:13:40

夜夜夜夜发表于 2016-6-16 15:48
有样头1天应该知道吧，当天来就先放冷藏柜第2天捡

最怕赶货

。以后应该可以提前一点知道。谢谢你

温暖的小萝卜头 · 发表于 2016-6-16 22:22:24

初斑发表于 2016-6-16 22:08
保存时间一周？这个需要进行验证么？验证菌活力为一周

当然需要验证。不过有资料(忘了是GMP指南还是药品检验标准操作规程)是说，斜面可以保存一个月或者三个月。所以我们暂定一周。

温暖的小萝卜头 · 发表于 2016-6-16 22:23:15

初斑发表于 2016-6-16 22:11
那您的意思是用固体培养么？固体培养的话，刮取多少也是有一定的误差。额，也有可能是技术问题液体的 ...

反正用哪个习惯就用哪个吧。

351482665 · 发表于 2016-6-17 10:31:27

初斑发表于 2016-6-16 22:12
当天制备？你们是从头天传代的斜面上直接做菌悬液是么

就是提前一天传代，传到平板上，培养18小时左右，第二天直接用它制备菌液

liangliangliu12 · 发表于 2016-6-25 14:28:03

谢谢分享！

xiaomi0505 · 发表于 2016-8-9 22:21:08

第三代到第五代都可以用于工作菌株。菌悬液制备方法：用接种环挑取菌落到相应液体培养基中按规定时间进行培养，培养到时间后稀释即可，室温保存2小时冰箱保存24小时

小金库 · 发表于 2023-5-7 12:02:36

非常感谢分享

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