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附件是一篇《AFB1 酶免试剂盒中酶标抗原的稳定性研究》的文章跟大家分享。 摘要:文章研究了通过添加保护剂,使AFB1 酶免试剂盒中冻干的酶标抗原溶解后能保存更长时间。采用4 种保护剂( 叠氮钠、硫柳汞、BSA、Proclin)分别加入酶标抗原稀释液进行ELISA试验, 考察溶解状态下的酶标抗原保存在4 ℃冰箱和37 ℃保温箱中的稳定性。结果得出, 加保护剂Proclin 的稳定效果最好, 酶标抗原溶液在4 ℃冰箱能保存6 个月以上, 提高了试剂盒的质量。 实验结果:见附件 结论与讨论:试验发现, 4 种保护剂对酶标抗原溶液的保存产生各种不同的影响。AFB1 酶免试剂盒中冻干的酶标抗原是辣根过氧化物酶(HRP) 和黄曲霉毒素B1 的结合物, 而叠氮钠[ 2 -3] 和HRP[ 4 -5] 之间也存在结合, 这种结合能使HRP 的构象发生变化从而使酶部分失活, 对HRP 的活性有抑制作用。HRP 结构中含有金属离子和二硫键, 硫柳汞的加入影响了HRP 的构型, 导致HRP 的活性和热稳定性下降。牛血清白蛋白( BSA) 刚加入时是对酶标抗原产生了一定的保护作用, 但试验中发现, 随着存放时间延长, BSA 溶液变浑浊, 因为它本身是一种蛋白, 出现浑浊则蛋白结构可能发生变化, 失去了保护作用。而加入Proclin, 酶标抗原溶液的活性没有发生任何的改变, 试剂盒的各项技术指标也均未受影响。原因可能是Proclin 的加入没有影响HRP 的微结构和构象, 反而使HRP和黄曲霉毒素B1 的结合更加牢固, 增强了酶标抗原的热稳定性, 使酶标抗原具有更长的保存时间。 笔者通过在AFB1 酶联试剂盒中酶标抗原溶液中添加保护剂, 对其稳定性进行了改进研究, 使试剂盒的保质期延长,同时提高了试剂盒的产品质量, 也能使检测机构方便、灵活的使用。
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