细胞培养中对液氮罐的使用

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研究表明，在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。
这之后，为保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般是-196℃液氮温度，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂的（一般为二甲基亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，然后保存在液氮中。
细胞培养的一般过程，主要包括准备、取材、培养和冻存复苏5步，
步骤如下：
1、培养皿或培养瓶中细胞按常规方法消化，或分离获得原代细胞后，收集于离心管中。
2、使用离心机离心，去除上清，收集细胞沉淀。
3、根据细胞生长密度加入适量的LiveCyteTM细胞冻存液进行重悬，充分混匀。
4、将细胞悬液分装至冻存管中，直接放置于-80°C冰箱保存，24小时后可移入液氮长期保存。
细胞复苏流程：
1、从液氮罐中取出细胞。
2、迅速放入37°C水浴，并不时摇动，在3分钟之内使其完全融化。
3、在冻存管中加入少量完全培养基，再将细胞混合液移入含有该细胞完全培养基的离心管中，样品和培养基比例为1：10，然后轻轻吹打，混合均匀。
4、离心后去除上清，收集细胞沉淀。
5、轻轻弹松细胞沉淀，加入适量培养液后接种于培养瓶或培养皿中，轻轻晃动使细胞分布均匀，置于37℃孵箱中培养。

拐角1

不考虑用个程序降温盒吗

cxj0205

遵循慢冻速溶嘛

阿宝问药

你这样做不太好，就算用了冻存盒，降温的速度或是降温的流程次与次之间也是有巨大差别，如果是搞科研也就算了，如果想往药上走，得用程序降温仪，用降温程序来冻存细胞，最后转移到气相液氮罐中。

Haoim1

复苏时如果37度有点慢，可以上40度