细菌内毒素干扰试验

GYT

请教各位大神！
我司进来想对限值为0.5EU/ml的样品进行内毒素分析方法验证，但由于目前对药典内毒素的干扰试验理解不明想请教一下有哪位大神可以教教我具体应该怎么进行试验。
目前对，需要进行2λ、λ、0.5λ、0.25λ试验怎么用样品进行稀释不太理解。如果我用0.125灵敏度的鲎试剂，限值为0.5EU/ml。我看的相关资料是在工作标准品稀释的时候就直接用样品代替检查用水进行稀释。但我不太理解的是我应该用原样直接进行稀释还是用稀释之后的4倍样品进行标准品的稀释，还是用2倍稀释的样品进行标准品的稀释。

canus

首先把日常检测与干扰的分开进行理解，再把FDA美国药典与中国药典分开。
讲下中国药典：
理解凝胶法原理。
λ是灵敏度。干扰实验中的讲法：需要看干扰的目的。干扰实验的配比目的，若看不到图片也可以看1143中国药典内毒素检查法file:///C:/Users/sheep/Desktop/%E4%BC%81%E4%B8%9A%E5%BE%AE%E4%BF%A1%E6%88%AA%E5%9B%BE_16764298784882.png
A,B两组是供试液，是用来区分标准品稀释不同浓度下对供试液结果的干扰实验。C,D两组使用的是检查用水稀释的。B,C两组是为了区分供试液与是否对其内毒素浓度有干扰；D组纯纯的阴性对照。

canus

假设你的λ=0.125，2λ就是0.25。（灵敏度选择过小了）
在做稀释液时不考虑您的限值。标准品在B组用供试液稀释；在C组用检查用水稀释。全部稀释成对应细菌内毒素的浓度。
一般细菌内毒素标准品为10EU/支，那就稀释分批次稀释到2λ。最大稀释倍数不要超过100，分批次稀释吧。还是灵敏度选择的小了。

GYT

canus 发表于 2023-2-15 11:10
假设你的λ=0.125，2λ就是0.25。（灵敏度选择过小了）
在做稀释液时不考虑您的限值。标准品在B组用供试液 ...

您说的不考虑限值，用稀释液稀释。是指我直接用原样把标准品从1EU/ml开始一直稀释到0.25EU/ml、0.125EU/ml、0.0625EU/ml、0.03125EU/ml吗

canus

是呀，做这个干扰实验的时候不需要考虑样品的限值。
看清楚是B组，C组是检查用水

风中客1

药典里有详细的操作要求，仔细阅读并理解了就行

GYT

canus 发表于 2023-2-15 11:31
是呀，做这个干扰实验的时候不需要考虑样品的限值。
看清楚是B组，C组是检查用水

好的，谢谢

瓶瓶

看药典

医药化工人

学习了，受益匪浅

并州牧

学习了，受益匪浅