细胞复苏时融化至米粒大小冰块，请问其可行性与适配性

Trocy-zizi · 发表于 2023-4-11 16:32:22

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细胞技术小白的疑惑：

尚恩生物 293[HEK 293](人胚肾细胞)细胞培养教程中的“细胞复苏”攻略中描述：融化至米粒大小冰块，终止水浴，避免过度水浴或水浴时间不足。

第一次看到这种描述，请问各位老师，这个方法异于常说的“速融法”，请问为什么这个细胞却可以用这个方法，保留冰块呢？不会涉及冰晶损伤？

ZXDg1n · 发表于 2023-4-11 16:39:28

余温会让他融化，作为一个比较好判断的标准来避免复苏过度

Trocy-zizi · 发表于 2023-4-11 16:44:13

ZXDg1n 发表于 2023-4-11 16:39
余温会让他融化，作为一个比较好判断的标准来避免复苏过度

你好，因为我们公司的SOP以及看比较多的资料，都是写使全部融化，怕冰晶损伤。请问贵司也是按上文操作的吗？米粒大小这个描述看起来很精准，会不会实操起来不好掌控呢？如果是全部融化后，常温下未加培养基的情况下，可以放置多久呢？

wancong123 · 发表于 2023-4-11 17:23:04

一般底部留有少量的冰块即可，等酒精擦拭转移至操作台，及开始加培养基，这段时间足矣化完

Trocy-zizi · 发表于 2023-4-11 17:24:51

wancong123 发表于 2023-4-11 17:23
一般底部留有少量的冰块即可，等酒精擦拭转移至操作台，及开始加培养基，这段时间足矣化完

抱歉，这里还有一个问题想请教一下，水浴锅一般会设置在距离实验室比较远的地方吗？还是说就在室内水浴或者通过传递窗隔离了水浴锅和实验室呢？

wancong123 · 发表于 2023-4-11 17:28:07

实验室内啦，靠近你要复苏的台子旁，这样能达到快速复苏

Trocy-zizi · 发表于 2023-4-11 17:32:20

wancong123 发表于 2023-4-11 17:28
实验室内啦，靠近你要复苏的台子旁，这样能达到快速复苏

啊，延伸出了一个问题，请问您所说的实验室是属于检验类实验室还是研发生产类实验室呢？就是洁净度是达到什么标准或有没有隔离器之类的呢？

wancong123 · 发表于 2023-4-12 08:46:34

Trocy-zizi 发表于 2023-4-11 17:32
啊，延伸出了一个问题，请问您所说的实验室是属于检验类实验室还是研发生产类实验室呢？就是洁净度是达到 ...

复苏不得生物安全柜吗，背景环境怎么也得C级吧，隔离器一般都是无菌检测时用
，复苏细胞生物安全柜就行了

Trocy-zizi · 发表于 2023-4-12 17:05:52

wancong123 发表于 2023-4-12 08:46
复苏不得生物安全柜吗，背景环境怎么也得C级吧，隔离器一般都是无菌检测时用
，复苏细胞生物安全柜就行 ...

谢谢，信息挺有用

[研发注册] 细胞复苏时融化至米粒大小冰块，请问其可行性与适配性

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