生物指示剂孢子接种量计算

致逝青春qtw

    无菌制剂，灭菌验证中，根据注射剂灭菌和无菌工艺研究及验证指南，附件2中，生物指示剂的接种量计算公式：
   lgN0=F(t,z)/Dt+lgNT
灭菌参数为121℃，12min，F0值≥12；生物指示剂的D值为1.74min；
怎么推算出lgN0接种量，请详细解读、指教！

准圣级药老

无菌保障水平就是要到十的负六次方啊，这些都有了，你带入公式不就行了。

致逝青春qtw

制药初学者 发表于 2023-12-20 13:27
无菌保障水平就是要到十的负六次方啊，这些都有了，你带入公式不就行了。

生物指示剂厂家说公式有问题，会出现阳性！

致逝青春qtw

致逝青春qtw 发表于 2023-12-20 15:03
生物指示剂厂家说公式有问题，会出现阳性！

那是肯定的；但是问题还得解决不是吗？

danhuang258

这个公式一共有4个参数，分别是生物指示剂的D值，芽孢数、灭菌后的芽孢数以及灭菌程序的F0值。一般生物指示剂的D值由厂家进行标注，灭菌程序的F0值可以通过验证得到。困扰楼主的点是在于灭菌后的生物指示剂的芽孢数量是未知的，因为<1cfu的微生物是无法通过现有的技术手段监测。这里有一个误区，就是生物指示剂呈阴性不代表生物指示剂的SAL=10^-6。
这个公式主要用于计算以产品特性进行灭菌生物指示剂接种量。举个例子：灭菌程序F0=8min，指示剂D值为2min，指示剂灭菌后，对指示剂进行计数，芽孢数量为3X10^3，这个时候可以用这个式子计算初始的生物指示剂接种量。

danhuang258

以指示剂供应商的角度来说，LgNt是无法探测的，所以公式的适用性要进行更进一步的讨论。因为供应商要保证客户在使用生物指示剂的过程中，灭菌验证一定要呈全阴性的。一旦有阳性产生，客户首先会质疑产品的质量问题。假如灭菌程序将生物指示剂杀灭到10^-2，意味着100支生物指示剂有1支是阳性的，而这个结果验证是没办法接受的。所以《欧洲药典》和新版GMP建议客户根据灭菌程序选择相应的生物指示剂，即灭菌程序将生物指示剂杀灭到10-^1~10^-3之间。
这里说明一下：新版GMP中关于生物指示剂的F0值计算公式和CDE的《化药品灭菌指南》的定义是有冲突的。

致逝青春qtw

danhuang258 发表于 2024-1-4 15:34
以指示剂供应商的角度来说，LgNt是无法探测的，所以公式的适用性要进行更进一步的讨论。因为供应商要保证客 ...

询问了生物指示剂的供应商，大多说“注射剂灭菌和无菌工艺研究及验证指南”附件中的公式是错误的，但是做为生产企业，没有资本也没有能力去挑战法规。现在很多实验了国内几家供应商的产品，大厂出品的基本有阳性，小厂出品的反而很成功。但是如果按照生物指示剂的杀灭时间，现有的灭菌程序物理F0值是不够杀灭时间的！
    这也就造成了现在的局面，企业不知道该使用 什么标准的生物指示剂来进行实验？D值过大的生物指示剂会出现阳性，D值太小了F0值又不能满足法规要求，头疼！!!!!!!

woshiwangkai

danhuang258 发表于 2024-1-4 15:22
这个公式一共有4个参数，分别是生物指示剂的D值，芽孢数、灭菌后的芽孢数以及灭菌程序的F0值。一般生物指示 ...

D2.0含菌量3.3*10^6怎么就能满足F08呢

woshiwangkai

danhuang258 发表于 2024-1-4 15:22
这个公式一共有4个参数，分别是生物指示剂的D值，芽孢数、灭菌后的芽孢数以及灭菌程序的F0值。一般生物指示 ...

请教您，麻烦您指导下正在因为指示剂问题犯难

danhuang258

woshiwangkai 发表于 2024-9-27 14:27
D2.0含菌量3.3*10^6怎么就能满足F08呢

生物指示剂F0计算方法=D值*log（芽孢数量）。您提供指示剂参数的F0=2*log 3.3*10^6=2*6.51=13min。
如果用于验证F0=8min的灭菌程序，指示剂大概率是阳性的。

sctealive

致逝青春qtw 发表于 2024-3-3 15:40
询问了生物指示剂的供应商，大多说“注射剂灭菌和无菌工艺研究及验证指南”附件中的公式是错误的，但是做 ...

我们现在也是遇到这个问题。我们还是115度的残存概率法。